构建下调基因（shRNA），定制服务

小发卡 RNA（small hairpin RNA，shRNA）是一种用于下调特定基因表达的有效工具。它在基因功能研究、疾病治疗和生物技术等领域发挥着重要作用。

shRNA 是一种短的 RNA 分子，具有类似发卡的结构。它由两个互补的序列组成，形成一个茎环结构。shRNA 的设计通常基于目标基因的序列，选择一段特定的序列作为 shRNA 的靶向区域。通过将 shRNA 导入细胞中，它可以利用细胞内的 RNA 干扰（RNA interference，RNAi）机制来下调目标基因的表达。

RNAi 是一种天然存在的细胞机制，用于调节基因表达。当 shRNA 被导入细胞后，它会被细胞内的酶加工成小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）。siRNA 与一种称为 RNA 诱导沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC）的蛋白质复合物结合。RISC 利用 siRNA 作为引导，识别并结合到目标 mRNA 上，然后通过切割或抑制翻译等方式下调目标基因的表达。

构建 shRNA 通常需要以下几个步骤：首先，设计 shRNA 的序列。可以使用在线工具或软件来选择合适的靶向区域，并设计出具有高效沉默效果的 shRNA 序列。然后，合成 shRNA 的 DNA 模板。可以通过化学合成或 PCR 扩增等方法获得 shRNA 的 DNA 模板。接下来，将 shRNA 的 DNA 模板克隆到合适的载体中。常用的载体包括质粒、慢病毒载体等。最后，将构建好的 shRNA 载体导入细胞中。可以使用转染、病毒感染等方法将 shRNA 载体导入细胞，实现对目标基因的下调。

shRNA 具有许多优势。首先，它具有高度的特异性。可以根据目标基因的序列设计出特异性的 shRNA，只下调目标基因的表达，而对其他基因的影响较小。其次，shRNA 可以实现长期的基因沉默。一旦 shRNA 被导入细胞并整合到基因组中，它可以持续发挥作用，实现长期的基因下调。此外，shRNA 还可以与其他技术相结合，如基因编辑、高通量筛选等，进一步拓展其应用范围。

在基因功能研究中，shRNA 可以用于下调特定基因的表达，观察其对细胞表型和生物学过程的影响。通过比较下调前后的细胞状态，可以深入了解基因的功能和作用机制。在疾病治疗方面，shRNA 可以用于治疗一些由特定基因过度表达引起的疾病，如癌症、遗传性疾病等。通过下调致病基因的表达，可以达到治疗疾病的目的。在生物技术领域，shRNA 可以用于调控细胞内特定基因的表达，以生产有用的蛋白质或代谢产物。

然而，shRNA 技术也存在一些挑战和限制。例如，shRNA 的沉默效果可能受到多种因素的影响，如 shRNA 的设计、载体的选择、细胞类型和环境等。此外，长期使用 shRNA 可能会引起一些非预期的副作用，如影响细胞的正常生理功能或引起免疫反应等。因此，在使用 shRNA 技术时，需要进行充分的实验设计和验证，以确保其安全性和有效性。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

麦胚凝集素(WGA)慢病毒载体的构建

构建慢病毒或者腺病毒质粒

pLenti-Puro - 基因载体质粒

CRISPR/Cas9质粒

质粒构建和克隆

基因过表达质粒

shRNA干扰质粒

shRNA干扰对照质粒

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。