“敲除”相关哺乳动物基因，技术服务

在哺乳动物基因研究中，“敲除” 特定基因是一种重要的实验手段，它可以帮助我们深入了解基因的功能以及在生物体内的作用机制。

基因敲除是指通过特定的技术，使生物体中的某个特定基因失去功能。在哺乳动物中，常用的基因敲除方法包括基于同源重组的基因敲除和基于 CRISPR/Cas9 技术的基因敲除。

基于同源重组的基因敲除是一种较为传统的方法。其基本原理是利用细胞内的同源重组机制，将含有特定基因突变的 DNA 片段导入细胞中，与细胞内的野生型基因发生同源重组，从而替换掉野生型基因，实现基因敲除。这种方法的优点是敲除效果比较稳定，但是操作相对复杂，效率较低。

近年来，基于 CRISPR/Cas9 技术的基因敲除方法得到了广泛应用。CRISPR/Cas9 系统是一种原核生物的免疫系统，经过改造后可以在哺乳动物细胞中实现高效的基因编辑。其基本原理是利用一段特定的向导 RNA（gRNA）引导 Cas9 核酸酶识别并切割目标基因的特定序列，从而造成基因的双链断裂。细胞通过非同源末端连接（NHEJ）或同源重组修复（HDR）机制对断裂的 DNA 进行修复，在这个过程中可能会引入插入、缺失或替换等突变，从而实现基因敲除。这种方法具有操作简单、效率高、特异性强等优点。

基因敲除在哺乳动物基因研究中有很多重要的应用。首先，它可以用于研究基因的功能。通过敲除特定基因，观察生物体的表型变化，可以推断出该基因在生物体内的功能。例如，敲除某个与疾病相关的基因，可以研究该基因在疾病发生发展中的作用。其次，基因敲除可以用于构建疾病模型。通过敲除特定基因，可以构建出具有特定疾病表型的动物模型，

然而，基因敲除技术也存在一些局限性。首先，基因敲除可能会引起一些非预期的副作用。例如，敲除某个基因可能会影响其他基因的表达，或者导致生物体的发育异常等。其次，基因敲除的效果可能会受到多种因素的影响，如细胞类型、发育阶段、环境因素等。因此，在进行基因敲除实验时，需要进行充分的实验设计和验证，以确保实验结果的可靠性。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

质粒点突变

点突变质粒

定点突变服务

定点突变是指通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需突变，包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。

目的基因及其载体 定点突变服务

单一突变服务

突变文库服务

以及高通量DNA突变库构建服务

产品：

MicroRNA抑制表达稳转细胞系构建服务

构建慢病毒表达载体

质粒载体-各类质粒载体构建

质粒载体介导的表达ERCC1shRNA的质粒构建

用于植物多基因表达载体构建的质粒系统

通用真核质粒表达载体的构建

麦胚凝集素(WGA)慢病毒载体的构建

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。