全基因组获得性功能筛选-慢病毒文库(转录激活基因编辑文库),定制服务,齐岳生物供应
全基因组获得性功能筛选 - 慢病毒文库(转录激活基因编辑文库)是一种用于研究基因功能和发现新的生物学机制的强大工具。
这个文库基于 CRISPR-Cas9 技术的转录激活系统,通过设计特定的向导 RNA(gRNA)和融合了转录激活因子的 Cas9 蛋白,实现对全基因组基因的转录激活。慢病毒作为载体,能够高效地将这些基因编辑工具导入细胞中,进行全基因组范围内的获得性功能筛选。
构建这个慢病毒文库需要精心的设计和实验操作。首先,确定全基因组中的目标基因,并设计针对这些基因的 gRNA 序列。然后,将融合了转录激活因子的 Cas9 蛋白和 gRNA 克隆到慢病毒载体中,形成一个包含大量不同 gRNA 的文库。每个 gRNA 都能够引导转录激活因子结合到目标基因的启动子区域,从而激活该基因的转录。
全基因组获得性功能筛选 - 慢病毒文库具有许多优势。首先,它提供了一种高通量的筛选方法,可以同时激活大量基因,快速发现具有特定功能或与特定生物学过程相关的基因。其次,慢病毒载体的感染效率高,能够在不同类型的细胞中实现稳定的基因激活。
齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务,包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体(含 Cas9)与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中,在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后,细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复(HDR)实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。
基因敲入细胞定制流程
根据客户需求和靶基因的情况进行基因点突变方案设计
构建gRNA载体和Donor载体
通过核转染法将gRNA载体和Donor载体共转入目标细胞
筛选出成功实现目的片段定点敲入的阳性克隆
对阳性克隆进行扩增和测序验证
产品:
CRISPR/Cas9基因敲除
基因Mc3R、基因Mc4R 双基因敲除大鼠
TALEN基因敲除小鼠
斑马鱼等模式动物基因敲除模型
Cas9-Cell Line Gene Knock-Out service(CGKO)基因敲除细胞系服务
细胞基因敲除服务
基因敲除细胞株
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。