名称:荧光素FITC标记半胱氨酸蛋白酶
纯度:98%
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
荧光素(FITC)标记半胱氨酸蛋白酶是一种用于生物研究的重要工具,尤其在研究蛋白酶的活性、定位和相互作用方面。
以下是标记的基本步骤和注意事项:
合成步骤:
准备酶和荧光素:
将半胱氨酸蛋白酶溶解在适当的缓冲液中(如PBS),浓度通常在1-5 mg/mL。
将FITC溶解在无水DMSO或其他合适的溶剂中,通常制备为5-10 mg/mL。
标记反应:
将FITC溶液逐滴加入到蛋白酶溶液中,反应在4°C或室温下进行,反应时间一般为1-2小时。
确保反应在避光环境中进行,以防止荧光素降解。
终止反应:
可以通过添加还原剂(如DTT或β-巯基乙醇)终止反应,防止非特异性反应。
纯化:
使用透析、凝胶过滤或离心等方法去除未结合的FITC。
检查标记的蛋白质浓度和荧光强度。
鉴定:
使用UV-Vis分光光度计或荧光光谱仪分析标记效率和荧光特性。
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