弓形虫Hsp90基因敲除转染质粒;Hsp90-5'UTR-3'UTR-PBLE-pBluescript,定制服务
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
质粒的结构组成
靶向序列:含有与弓形虫 Hsp90 基因特异性互补的序列。在 CRISPR - Cas9 系统中,这部分序列引导 Cas9 蛋白精准地定位到 Hsp90 基因的目标位点,使得 Cas9 能够切割双链 DNA,启动基因编辑过程。对于同源重组技术,靶向序列则是用于引导重组酶或者其他修复机制,使供体 DNA 与靶基因发生同源重组。
选择标记基因:通常带有抗生素抗性基因,如嘌呤霉素抗性基因等。在转染弓形虫后,通过在含有相应抗生素的培养基中培养,可以筛选出成功转染并整合了质粒的弓形虫细胞。这是因为只有含有抗性基因的弓形虫才能在含有抗生素的环境中存活和增殖,从而便于后续实验对敲除 Hsp90 基因的弓形虫进行富集和鉴定。
复制起始位点和调控元件:为了保证质粒在宿主细胞(如大肠杆菌用于质粒的扩增)和弓形虫细胞中的复制和稳定存在,含有合适的复制起始位点。同时,还可能包括一些转录调控元件,用于控制基因编辑相关元件(如 Cas9 基因或者重组酶基因)的表达,以确保在合适的时间和水平进行基因敲除操作。
齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
齐岳生物提供的定制服务:
构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统
构建基因点突变的小鼠胚胎模型
构建基因截短体质粒
构建基因敲除的细胞系
构建慢病毒表达载体
构建慢病毒或者腺病毒质粒
构建慢病毒载体
构建四环素诱导的YAP1敲减的病毒质粒
构建下调基因(shRNA)
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除