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产品名称:FITC标记胆红素的标记方法
一、标记方法
1. 化学偶联法
原理:利用胆红素分子的羟基或羧基与FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)发生亲核加成反应。
步骤:
活化胆红素:在碱性条件下(pH 8.5-9.0)溶解胆红素。
添加FITC:缓慢滴加FITC的DMF溶液,室温避光反应2-4小时。
纯化:通过透析或凝胶过滤去除未反应的FITC。
关键点:
胆红素对光和碱敏感,需全程避光、控制pH。
反应需过量FITC(摩尔比1:5-1:10)以提高标记效率。
2. 间接标记法
原理:通过中间载体(如抗体、适配体)间接连接胆红素与FITC。
步骤:
合成载体-胆红素复合物:如用胆红素特异性抗体包被磁珠。
FITC标记载体:将FITC与载体共价结合。
纯化:分离未结合的FITC。
优势:避免直接修饰对胆红素活性的影响。
二、应用领域
1. 生物成像
细胞内胆红素分布:标记后通过荧光显微镜观察胆红素在细胞内的定位(如线粒体、溶酶体)。
组织切片分析:用于研究胆红素在肝、脑等组织中的蓄积与代谢。
2. 药物递送
纳米载体可视化:将FITC标记的胆红素包封于脂质体或聚合物纳米颗粒中,追踪药物释放过程。
3. 生物传感器
胆红素检测:基于FITC荧光信号的强度变化,开发高灵敏度胆红素检测平台。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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