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Cy3-NH₂,Cy3-氨基在什么条件下可以发光?
发布时间:2025-05-16     作者:ssl   分享到:

Cy3-NH₂(Cy3-氨基)在什么条件下可以发光?

Cy3-NH₂(Cyanine 3-amine)本身是一种具备荧光性能的染料,即使未与靶标偶联,也可在特定环境中发光。但其荧光强度、稳定性和应用效果与所处环境、溶剂、结合状态密切相关。


一、基本发光条件

  1. 光源激发

    • 激发波长:约550 nm(绿光)

    • 激发设备:荧光显微镜、激光共聚焦、微孔板读数仪、流式细胞仪等

    • 滤光片:TRITC或Cy3通道滤光片适配

  2. 发射波长

    • 约570–575 nm

    • 显现橙红色荧光信号,亮度高,适合多重染色实验

    Cy3-NH₂,Cy3-氨基

  3. 溶剂环境

    • 常用溶剂:DMSO、乙醇、PBS(含少量Tween可防沉淀)

    • 荧光在极性溶剂中表现更稳定,避免使用强酸碱或含重金属体系


二、不同状态下发光表现

状态荧光强度特性说明
游离状态(未偶联)中等偏强可直接用于染色或标准参照
偶联蛋白/寡核苷酸后显著增强稳定性与信噪比更佳,适用于成像
在高浓度或自聚集状态发光减弱可发生自猝灭(quenching)
极酸/极碱或高温条件下荧光减弱甚至消失染料结构不稳定,建议回避
与金属表面/纳米粒子结合视体系而定可增强或猝灭,需优化设计


三、发光应用示例

  1. 纯染料荧光参考:用于荧光标准曲线、通道校准、滤光片测试

  2. 细胞成像:在偶联或包载后,用于细胞膜、细胞器或胞内示踪

  3. 核酸杂交:Cy3-NH₂标记的寡核苷酸用于FISH探针、引物检测

  4. FRET研究:作为供体(与Cy5等受体配对),用于分子相互作用分析

  5. 纳米材料标记:将其接枝至纳米粒子表面,用于靶向和可视化


总结
Cy3-NH₂ 并非“反应后才发光”,其本身具有良好的荧光性能。但通过偶联、生物修饰或优化环境条件,可进一步提升其发光效率与生物适配性,从而实现更高效、灵敏的荧光分析与成像。

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