一、基本信息
FITC-PEG-BIOTIN(荧光素-聚乙二醇-生物素)
FITC-PEG-BIOTIN 是一种三功能连接分子,由荧光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分组成。FITC 具备绿色荧光示踪功能(Ex/Em:495/519 nm),PEG 提供分子柔性和亲水性,可增强溶解性与稳定性,而生物素能特异性结合亲和素或链霉亲和素。此构造常用于构建荧光标记的靶向系统、生物成像、纳米载体修饰和亲和捕获等研究。适合在细胞实验、诊断检测或蛋白探针标记中使用,兼具识别与成像双重功能。
中文名称:荧光素标记聚乙二醇-生物素
英文名称:FITC-PEG-Biotin
别名:荧光生物素-PEG、FITC-PEGₙ-Biotin、FITC-PEGylated Biotin
CAS号:无固定CAS(为定制连接分子)
结构类型:FITC—PEG—Biotin(三元功能分子)
二、分子构成与说明
FITC-PEG-Biotin 是一种三功能修饰分子,由以下三部分组成:
1. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
提供绿色荧光信号,便于可视化标记或荧光成像;
通常通过异硫氰酸酯与氨基反应形成稳定硫脲键。
2. PEG(聚乙二醇)
提高分子亲水性和柔韧性;
分子量常用规格为:PEGₙ = 500、1000、2000、3400、5000;
通过线性或单端官能化PEG提供空间间隔作用,减少非特异性结合。
3. Biotin(生物素)
可与链霉亲和素/亲和素高亲和结合(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M);
用于靶向捕获、固定化、免疫分析等生物识别场景。
三、物化属性
项目 | 参数 | ||
分子量 | 约 800–6000 Da(取决于 PEG 分子量) | ||
外观 | 淡黄色至橙黄色固体或粘稠液体(低MW为固体,高MW为粘稠液) | ||
溶解性 | 良好溶于水、PBS、DMSO、DMF、乙醇等;不溶于醚类或烃类溶剂 | ||
荧光激发波长 | λ_ex ≈ 490–495 nm | ||
荧光发射波长 | λ_em ≈ 518–520 nm(绿色荧光) | ||
稳定性 | 干燥避光条件下稳定,溶液中较易光解 | ||
储存条件 | 干燥粉末建议 -20°C 密闭避光储存;水溶液推荐分装于避光小管中冷冻保存 | ||
pH 稳定范围 | *佳使用范围为 pH 6.5–8.0 |
|
四、制备方法简介
FITC-PEG-Biotin 典型合成路线如下:
1. 合成 PEG-Biotin:通过 NHS-Biotin 与氨基修饰 PEG 发生酰胺键反应;
2. 连接 FITC:使用 FITC 与 PEG-Biotin 末端氨基反应,形成稳定的 FITC-PEG-Biotin;
3. 纯化:使用透析、凝胶过滤或 HPLC 纯化;
4. 干燥:低温冻干以便于储存与运输。
五、主要应用领域
1. 荧光示踪与成像
可用于细胞、组织、纳米粒子的可视化;
绿色荧光适配多种共聚焦显微镜、流式细胞仪检测系统。
2. 亲和素-生物素系统中的荧光标记探针
与亲和素/链霉亲和素偶联物结合实现高亲和荧光成像或固定化;
常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕获、荧光免疫分析等。
3. 纳米材料功能化修饰
修饰脂质体、纳米粒、磁珠、纳米胶束、水凝胶等;
提供荧光与靶向双重功能。
4. PEG药物载体或蛋白偶联剂的构建
构建荧光示踪的 PEGylated 载药系统;
也可用于蛋白偶联物追踪研究其体内外行为。
六、常见规格与形式
名称 | PEG分子量 | 形式 | ||||
FITC-PEG500-Biotin | 500 Da | 固体 | -20°C 避光储存 | |||
FITC-PEG2000-Biotin | 2 kDa | 固体或粘稠液 | -20°C 避光储存 | |||
FITC-PEG5000-Biotin | 5 kDa | 粘稠液体 | -20°C 避光储存 |
七、使用方法建议
建议使用前用 DMSO 或 PBS 溶解至所需浓度;
避光操作,避免强光照射导致荧光团降解;
建议现配现用,长期存放可按 0.1–1 mg/mL 分装冻存;
配体修饰时,可与胺基表面、蛋白质或材料通过亲和素连接。
八、中文文献应用实例
1. 《生物医学工程学杂志》,2021
使用 FITC-PEG-Biotin 修饰多肽探针,通过链霉亲和素固定于微阵列芯片,用于微量生物标志物荧光检测。
2. 《分析化学》,2020
利用 FITC-PEG-Biotin 标记磁珠,实现细胞表面糖链识别和富集成像,验证其灵敏性与特异性。
3. 《药学学报》,2022
在肿瘤靶向纳米载药系统构建中,使用 FITC-PEG-Biotin 实现纳米颗粒的双功能修饰:生物素结合靶向、FITC荧光示踪体内分布。
九、优点总结
✅ 同时具备 亲和素结合能力 + 荧光可视化 + PEG链延展性;
✅ 可在不影响靶点结合的情况下提升水溶性;
✅ 操作简单、标记稳定,适合生物传感、材料修饰和体内示踪。
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