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FITC-PEG-BIOTIN,荧光素-聚乙二醇-生物素,FITC-PEGylated Biotin如何使用?
发布时间:2025-05-22     作者:zhn   分享到:

一、基本信息

FITC-PEG-BIOTIN(荧光素-聚乙二醇-生物素)

FITC-PEG-BIOTIN 是一种三功能连接分子,由荧光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分组成。FITC 具备绿色荧光示踪功能(Ex/Em495/519 nm),PEG 提供分子柔性和亲水性,可增强溶解性与稳定性,而生物素能特异性结合亲和素或链霉亲和素。此构造常用于构建荧光标记的靶向系统、生物成像、纳米载体修饰和亲和捕获等研究。适合在细胞实验、诊断检测或蛋白探针标记中使用,兼具识别与成像双重功能。

中文名称:荧光素标记聚乙二醇-生物素

英文名称:FITC-PEG-Biotin

别名:荧光生物素-PEGFITC-PEG-BiotinFITC-PEGylated Biotin

CAS号:无固定CAS(为定制连接分子)

结构类型:FITCPEGBiotin(三元功能分子)

FITC-PEG-BIOTIN 

二、分子构成与说明

FITC-PEG-Biotin 是一种三功能修饰分子,由以下三部分组成:

1. FITCFluorescein Isothiocyanate

   提供绿色荧光信号,便于可视化标记或荧光成像;

   通常通过异硫氰酸酯与氨基反应形成稳定硫脲键。

2. PEG(聚乙二醇)

   提高分子亲水性和柔韧性;

   分子量常用规格为:PEG= 5001000200034005000

   通过线性或单端官能化PEG提供空间间隔作用,减少非特异性结合。

3. Biotin(生物素)

   可与链霉亲和素/亲和素高亲和结合(Kd 10⁻¹⁵ M);

   用于靶向捕获、固定化、免疫分析等生物识别场景。

 

三、物化属性

项目

参数


分子量

800–6000 Da(取决于 PEG 分子量)


外观

淡黄色至橙黄色固体或粘稠液体(低MW为固体,高MW为粘稠液)


溶解性

良好溶于水、PBSDMSODMF、乙醇等;不溶于醚类或烃类溶剂


荧光激发波长

λ_ex ≈ 490–495 nm


荧光发射波长

λ_em ≈ 518–520 nm(绿色荧光)


稳定性

干燥避光条件下稳定,溶液中较易光解


储存条件

干燥粉末建议 -20°C 密闭避光储存;水溶液推荐分装于避光小管中冷冻保存

pH 稳定范围

*佳使用范围为 pH 6.5–8.0


                 |

 

四、制备方法简介

FITC-PEG-Biotin 典型合成路线如下:

1. 合成 PEG-Biotin:通过 NHS-Biotin 与氨基修饰 PEG 发生酰胺键反应;

2. 连接 FITC:使用 FITC PEG-Biotin 末端氨基反应,形成稳定的 FITC-PEG-Biotin

3. 纯化:使用透析、凝胶过滤或 HPLC 纯化;

4. 干燥:低温冻干以便于储存与运输。

 

五、主要应用领域

1. 荧光示踪与成像

可用于细胞、组织、纳米粒子的可视化;

绿色荧光适配多种共聚焦显微镜、流式细胞仪检测系统。

2. 亲和素-生物素系统中的荧光标记探针

与亲和素/链霉亲和素偶联物结合实现高亲和荧光成像或固定化;

常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕获、荧光免疫分析等。

3. 纳米材料功能化修饰

修饰脂质体、纳米粒、磁珠、纳米胶束、水凝胶等;

提供荧光与靶向双重功能。

4. PEG药物载体或蛋白偶联剂的构建

构建荧光示踪的 PEGylated 载药系统;

也可用于蛋白偶联物追踪研究其体内外行为。

 

六、常见规格与形式

名称

PEG分子量

形式




FITC-PEG500-Biotin

500 Da

固体

-20°C 避光储存



FITC-PEG2000-Biotin

2 kDa

固体或粘稠液

-20°C 避光储存

FITC-PEG5000-Biotin

5 kDa

粘稠液体

-20°C 避光储存



 

七、使用方法建议

建议使用前用 DMSO PBS 溶解至所需浓度;

避光操作,避免强光照射导致荧光团降解;

建议现配现用,长期存放可按 0.11 mg/mL 分装冻存;

配体修饰时,可与胺基表面、蛋白质或材料通过亲和素连接。

 

八、中文文献应用实例

1. 《生物医学工程学杂志》,2021

   使用 FITC-PEG-Biotin 修饰多肽探针,通过链霉亲和素固定于微阵列芯片,用于微量生物标志物荧光检测。

2. 《分析化学》,2020

   利用 FITC-PEG-Biotin 标记磁珠,实现细胞表面糖链识别和富集成像,验证其灵敏性与特异性。

3. 《药学学报》,2022

   在肿瘤靶向纳米载药系统构建中,使用 FITC-PEG-Biotin 实现纳米颗粒的双功能修饰:生物素结合靶向、FITC荧光示踪体内分布。

 

九、优点总结

✅ 同时具备 亲和素结合能力 + 荧光可视化 + PEG链延展性;

✅ 可在不影响靶点结合的情况下提升水溶性;

✅ 操作简单、标记稳定,适合生物传感、材料修饰和体内示踪。

 以上资料由小编zhn提供,仅用于科研


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