文献：近红外激活仿生纳米平台用于*特异性药物释放、渗透和原位胶质母细胞瘤的化学光热协同*

链接：https://www.tandfonline.com/doi/full/10.2147/IJN.S466268#d1e234

作者：李明，张新锐，周玉杰，褚玉腾，沉杰，蔡粤&孙宣荣

节选：

DSPE-PEG-Angiopep-2的合成

为合成 DEPE-PEG-Angiopep-2，将 5 毫克 DSPE-PEG-Mal 完全溶解于 10 毫升水中。然后，将 6 毫克 Angiopep-2-cys 加入溶液中，并在 37°C 下搅拌 12 小时。对溶液进行透析（分子量 3500），以去除过量的 Angiopep-2-cys。将所得纯化产物 DSPE-PEG-Angiopep-2 冷冻干燥，并储存于 −20°C 以备后续使用。

巨噬细胞膜的分离：将RAW264.7细胞以2.5×10 7 个细胞·mL −1的密度悬浮于冰冷的TM缓冲液（pH 7.4；10 mM Tris + 1 mM MgCl 2）中。随后，在冰浴条件下通过超声波破碎5分钟来使细胞破碎。随后将1 M蔗糖与细胞匀浆混合，最终达到0.25 M蔗糖浓度，将混合物在4°C下以2000 g离心约10分钟。所得上清液在3000 g下进一步离心30分钟后收集。引文43收集细胞膜，在含有0.25 M蔗糖的冰冷TM缓冲液中洗涤两次以进行纯化。引文44随后，通过BCA蛋白测定法测得膜蛋白含量约为每30×106个细胞0.25毫克。提取的巨噬细胞膜随后储存在-20℃下保存。

NP、M-NP和AM-NP的制备：

ICG/SN-38 纳米粒子 (NP) 的制备与之前报道一致，并进行了修改。引文45简而言之，将 1 mg ICG 和 1 mg SN-38 溶于 20 μL DMSO 中，然后加入 1 mL 水，超声处理 5 分钟。将制剂对蒸馏水（1 L）透析（MW3500）12 小时。然后，将一定量的巨噬细胞膜与 NP 溶液超声处理 2 分钟，得到巨噬细胞膜/ICG/SN-38（M-NP）。此外，将 M-NP 和 100 μg DSPE-PEG-Angiopep-2 超声处理（400 W，2 秒开/3 秒关，2 分钟）得到 1 mL Angiopep-2 修饰的 M-NP（AM-NP）。

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