纳米胶束是通过薄膜水合法制备的。将聚乙二醇化的脂质基单体（DMPE-PEG2000、DPPE-PEG 2000、DSPE-PEG2000，DOPE-PEG2000和DOTAP）（10mg）溶解在氯仿（2mL）中，并在45°C的低压下干燥以形成薄膜。然后在55°C下用PBS（3 mL）重新水合，然后在室温下以120 W的功率进行浴超声波处理5分钟，形成纳米胶束：MDMPE-PEG。MDPPE-PEG、MDSPE-PEG、MDOPE-PEG和MDOTAP。

对于M-P12的制备，将Pep12（CLPFD）溶液（PBS中的2 mL和2 mg mL-1）以1.5:1的摩尔比加入纳米胶束中（Pep12:DSPE-PEG2000-MAL）。

Pep12的巯基和DSPE-PEG2000-MAL的马来酰亚胺基团之间的偶联是通过Michael加成反应在室温下在黑暗中温和搅拌24小时完成的。将所得混合物用PBS（pH 7.4）透析24小时，以去除未偶联的Pep12。

通过分别用Pep13、PepTT和PepSS替换肽Pep12，应用相同的程序制备其他肽修饰的脂质核纳米胶束M-P13、M-TT和M-SS。为了构建P-P12，将由DSPE-PEG2000-MAL制成的胶束核替换为由PLA2000-PEG3400-MAL制备的聚合物核。

为了制备DiD标记的M-12，在薄膜水合法中加入DiD（38.4µg）以制备纳米胶束。这些负载DiD的纳米胶束用Pep12修饰，然后透析（<3500 Da）24小时，以在进一步实验之前去除多余的DiD。在所有细胞和体内实验之前，所有纳米胶束都经过过滤灭菌（0.22µm，Millipore，Billerica，MA，USA）。

采用薄膜水合法制备Lipo-P12。将大豆卵磷脂（180mg）和胆固醇（60mg）溶解在氯仿中，完全去除溶剂以获得薄膜。将其在PBS（10 mL，pH 7.4）中再水化，并在室温下用探头超声波仪（Scientz，中国宁波）在150 W下超声处理溶液5分钟，以获得脂质体（Lipo）。

将未改性的脂质体与DSPE-PEG2000-Pep12在60°C下孵育2小时，得到Lipo-P12。所有脂质体均通过过滤（0.22µm，Millipore，Billerica，MA，USA）灭菌，在使用前以14000 rpm离心2小时，并在4°C下储存。

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