产品名称:SH/Thiol-PEG-FA,巯基-聚乙二醇-叶酸的合成方法
合成方法
1. SH/Thiol-PEG-FA的合成路径
步骤1:PEG的活化
聚乙二醇(PEG)与对硝基苯氯甲酸酯(p-NPC)在碱性条件(如三乙胺)下反应,生成活化PEG(PEG-p-NPC)。
反应式:
HO-PEG-OH + p-NPC → PEG-O-C(O)-O-p-NO₂ + HCl
步骤2:巯基的引入
活化PEG的一端与巯基化合物(如半胱氨酸、HS-CH₂CH₂-NH₂)在EDC/NHS作用下酯化或酰胺化,生成SH-PEG。
反应式:
PEG-O-C(O)-O-p-NO₂ + HS-CH₂CH₂-NH₂ → SH-PEG-NH₂ + H₂O(需活化剂如EDC/NHS)
步骤3:叶酸的偶联
SH-PEG的另一端与叶酸在EDC/NHS作用下酯化,生成SH-PEG-FA。
反应式:
SH-PEG-NH₂ + FA → SH-PEG-FA + H₂O(需活化剂如EDC/NHS)
2. 关键参数
反应条件:
活化与偶联反应需在弱碱性条件(pH 8-9)下进行,温度控制在0-4℃以减少副反应。
巯基引入需在还原环境(如含DTT)中进行,避免氧化为二硫键。
纯化方法:
透析或凝胶色谱(GPC)去除未反应的小分子(如p-NPC、EDC、NHS)。
冷冻干燥得到高纯度固体产物。
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