产品名称：SH/Thiol-PEG-FA，巯基-聚乙二醇-叶酸的合成方法

合成方法

1. SH/Thiol-PEG-FA的合成路径

步骤1：PEG的活化

聚乙二醇（PEG）与对硝基苯氯甲酸酯（p-NPC）在碱性条件（如三乙胺）下反应，生成活化PEG（PEG-p-NPC）。

反应式：

HO-PEG-OH + p-NPC → PEG-O-C(O)-O-p-NO₂ + HCl

步骤2：巯基的引入

活化PEG的一端与巯基化合物（如半胱氨酸、HS-CH₂CH₂-NH₂）在EDC/NHS作用下酯化或酰胺化，生成SH-PEG。

反应式：

PEG-O-C(O)-O-p-NO₂ + HS-CH₂CH₂-NH₂ → SH-PEG-NH₂ + H₂O（需活化剂如EDC/NHS）

步骤3：叶酸的偶联

SH-PEG的另一端与叶酸在EDC/NHS作用下酯化，生成SH-PEG-FA。

反应式：

SH-PEG-NH₂ + FA → SH-PEG-FA + H₂O（需活化剂如EDC/NHS）

2. 关键参数

反应条件：

活化与偶联反应需在弱碱性条件（pH 8-9）下进行，温度控制在0-4℃以减少副反应。

巯基引入需在还原环境（如含DTT）中进行，避免氧化为二硫键。

纯化方法：

透析或凝胶色谱（GPC）去除未反应的小分子（如p-NPC、EDC、NHS）。

冷冻干燥得到高纯度固体产物。

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