Cyanine5-Lysozyme,荧光Cy5标记溶菌酶的结构合成
Cyanine5-Lysozyme 是通过将近红外荧光染料Cyanine5(Cy5)标记至溶菌酶(Lysozyme)分子上得到的荧光蛋白探针,具有双重功能:既保留溶菌酶对细菌细胞壁的裂解活性,又可用于近红外荧光成像。该探针应用于细菌追踪、细胞吞噬实验、抗菌机制研究及药物输运监测中。
合成该探针的关键在于染料与蛋白质之间的共价偶联。溶菌酶含有多个赖氨酸残基,Cy5-NHS酯可与其自由胺基反应形成稳定的酰胺键。反应步骤如下:
缓冲液准备:将溶菌酶溶于无胺缓冲液(如pH 8.0的PBS或碳酸盐缓冲液),浓度控制在1–5 mg/mL,避免胺类缓冲液干扰。
Cy5活性酯加入:将Cy5-NHS溶于DMSO中缓慢滴加至溶菌酶溶液中,反应在避光条件下室温进行30–60分钟。
去除未反应染料:使用超滤或凝胶层析(如PD-10柱)去除游离Cy5。
验证结构与活性:通过吸收光谱与蛋白浓度比确定Dye/Protein比(通常1–3 mol/mol),通过溶菌酶抑菌活性测定确保标记后仍保留功能。
表征:使用SDS-PAGE进行纯度检测,荧光扫描验证染料结合,质谱确认分子量变化,紫外-可见吸收与荧光发射光谱确认Cy5特征。
Cy5-Lysozyme 发射波长650–670 nm,具有良好的组织穿透性与成像分辨率。可用于活细胞内的溶菌酶追踪,也可与纳米载体复合,研究其在细胞吞噬、炎症调控和抗菌中的动态分布行为。
产品名称:Cyanine5-Lysozyme,荧光Cy5标记溶菌酶
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。
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