产品名称：ALC-0315-NHS/CHO/FITC的合成方法

合成方法

1. ALC-0315的羧基活化

方法一：直接合成ALC-0315-COOH

若ALC-0315原始结构不含羧基，需通过化学修饰引入：

氧化反应：将ALC-0315的末端羟基（-OH）氧化为羧基（-COOH），使用试剂如TEMPO/NaClO。

酯水解：若ALC-0315含酯基（-COO-），通过碱性水解（NaOH/MeOH）生成羧基。

2. NHS酯化

反应条件：

将ALC-0315-COOH与NHS在EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）催化下反应：

ALC-0315-COOH + EDC + NHS → ALC-0315-CO-NHS + EDC·NHS复合物

溶剂：无水DMF或DMSO（避免水解）。

pH：4.5-6.0（MES缓冲液）。

温度：室温，避光，反应时间2-4小时。

3. 纯化与表征

纯化方法：

透析：截留分子量3.5 kDa，去除未反应的NHS或EDC。

硅胶柱层析：洗脱剂为二氯甲烷/甲醇/氨水（梯度洗脱），分离目标产物。

表征手段：

质谱（MS）：确认分子量（如ALC-0315-CO-NHS的ESI-MS峰）。

核磁共振（NMR）：验证NHS酯基特征峰（δ 2.6-2.8 ppm，琥珀酰亚胺环质子）。

红外光谱（IR）：检测酯键（1740 cm⁻¹）和酰胺键（1650 cm⁻¹）的形成。

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