文献:*血管生成光动力疗法(PDT)利用针对血管生成血管特异性肽修饰的长循环脂质体
链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0005273605000295
作者:市川 佳 苗,引 田智 也,前田 典之 ,米泽 清 ,竹 内义 人,浅井 智博 ,难波幸 弘 ,奥 直 人
节选:
材料
DPPC、POPC、DPPG 和 PEG-DSPE 均为日本精细化学株式会社(日本兵库县高砂市)的产品。胆固醇购自 Sigma Chemical Co.(美国密苏里州圣路易斯市)。APRPG-PEG-DSPE 的合成方法如上所述[13]。BPD-MA 由 QLT Photo Therapeutics, Inc.(加拿大不列颠哥伦比亚省温哥华市)慷慨捐赠。
2.2 BPD- MA脂质体的制备及表征
将DPPC、POPC、胆固醇、DPPG和BPD-MA(摩尔比为10/10/10/2.5/0.3)溶于氯仿中,加入或不加入PEG-DSPE或APRPG-PEG-DSPE(脂质/PEG-DSPE或APRPG-PEG-DSPE=20/1),蒸发浓缩,减压干燥,真空保存至少1h。用生理盐水水化脂质薄膜,并用液氮冻融3次。然后将脂质体悬浮液在60℃下超声处理15min。*后,通过聚碳酸酯膜过滤器挤出脂质体,使其粒径为100nm。使用ELS-800电泳光散射分光光度计(日本大阪大塚电子株式会社)测定包覆BPD-MA的脂质体的粒径和ζ电位。血清存在下脂质体的聚集测定方法如下:将0.3 M葡萄糖制备的脂质体在生理盐水或50% FBS中于37 °C孵育60分钟(脂质体的*终浓度为0.5 mM,以PC计)。在750 nm处测定脂质体溶液的浊度。
BPD-MA的定量分析方法为:取脂质体溶液用磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)适当稀释,与3倍体积的MeOH混合,再与1倍体积的CHCl 3混合,在688nm处测定吸光度,根据标准曲线计算BPD-MA的含量。
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