5-FAM DBCO，5-FAM二本环辛炔的反应步骤

5-FAM DBCO 是一种结合绿色荧光团 FAM（5-carboxyfluorescein）与 DBCO（Dibenzocyclooctyne）的双功能探针，适用于“无铜点击反应”（SPAAC）中标记叠氮修饰的 DNA、RNA 或蛋白质。该分子能在生理条件下快速、高效地与叠氮基团反应，是进行生物分子荧光标记的理想试剂。

典型反应步骤如下：

1. 叠氮修饰生物分子准备：

在反应前，目标生物分子如DNA寡核苷酸、RNA链或蛋白质需通过化学方法引入叠氮基团。方法包括：使用叠氮修饰的磷酰胺单体、Azido-PEG-NHS 酯修饰蛋白胺基等。

2. 配制反应体系：

在缓冲液（如PBS, pH 7.2–7.5）中溶解待标记的叠氮修饰生物分子，加入5-FAM DBCO 试剂（推荐2~10倍摩尔过量）。由于反应无需催化剂，因此可避免铜离子对生物体系的性。

3. 点击反应进行：

将反应混合物在室温下孵育0.5–2小时。DBCO 基团与叠氮基团通过应变促反应形成稳定的1,2,3-三唑环结构，实现共价连接。同时 FAM 基团不会参与反应，荧光性能保留完整。

4. 纯化步骤：

反应完成后可采用HPLC（反相或阴离子交换）或凝胶渗透色谱（GPC）去除未反应的FAM DBCO 和副产物。标记后的生物分子可直接用于电泳分析、荧光检测或细胞实验。

该反应具有快速、温和、无需金属、反应产物稳定的特点，特别适合于对金属敏感或要求高保真度的生物体系。

产品名称：5-FAM DBCO，5-FAM二本环辛炔

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc