常用名 Atto 425-NHS酯
英文名 Atto 425-NHS ester
CAS号 892156-28-4
分子量 498.52500
分子式 C26H30N2O8
熔点 N/A
ATTO 425 NHS酯是一种高性能蓝色荧光染料,属于ATTO染料家族中的一员,具备光稳定性、量子产率和共价偶联能力。其分子结构中包含了ATTO 425荧光团以及活性的N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)官能团,可选择性与生物分子中的伯胺基(—NH₂)发生共价反应。
该染料特别适合用于蛋白质、寡核苷酸、多肽、抗体等生物大分子的荧光标记,是流式细胞术、共聚焦成像、FRET分析、超分辨显微成像(如STED)等技术中的优质蓝光探针。
主要应用场景
1. 蛋白质和抗体标记
ATTO 425 NHS可与蛋白质表面氨基(如赖氨酸侧链)共价偶联,不会破坏其天然构象,广泛应用于荧光免疫染色、免疫沉淀等研究中。
2. 寡核苷酸和引物修饰
通过在5'或3'末端引入伯胺基的寡核苷酸与该染料偶联,可获得用于荧光杂交、FISH分析或PCR探针检测的标记核酸。
3. 细胞与组织成像
ATTO 425标记的抗体或探针可用于荧光显微镜(包括共聚焦和超分辨)成像,尤其在多色实验中常作为蓝通道标记使用,避免与绿色或红色信号重叠。
4. 流式细胞术(Flow Cytometry)
由于激发光波长处于紫外-蓝光区域,ATTO 425适合配合405 nm或440 nm激光进行流式多参数检测。
5. FRET与分子间距研究
作为FRET供体,ATTO 425可搭配适当的受体(如ATTO 520、Alexa Fluor 488等)用于构建FRET系统,研究分子间相互作用或构象变化。
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