产品名称：FITC-HA-Biotin，荧光素-透明质酸-生物素的制备方法

制备方法

方法1：分步合成法

HA的活化

将HA（分子量10-100 kDa）溶解于MES缓冲液（pH 6.0），加入EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）和NHS（N-羟基琥珀酰亚胺），活化HA的羧基（-COOH），生成NHS酯中间体。

FITC标记

将FITC溶解于DMSO，缓慢滴加至活化后的HA溶液中，室温避光反应4小时，通过透析（MWCO 3.5 kDa）去除未反应的FITC，得到FITC-HA。

生物素修饰

将FITC-HA溶解于PBS（pH 7.4），加入生物素-NHS酯（或生物素-PEG-NHS），反应2小时，通过透析或凝胶过滤纯化，最终产物为FITC-HA-Biotin。

方法2：点击化学法（更高效）

炔烃修饰HA

将HA与炔丙基胺反应，引入炔烃基团（通过酰胺键连接）。

叠氮化FITC和生物素

合成叠氮基-FITC（如FITC-PEG-N₃）和叠氮基-生物素（如Biotin-PEG-N₃）。

点击偶联

在CuSO₄/抗坏血酸钠催化下，将炔烃-HA与叠氮基-FITC和叠氮基-生物素反应，生成FITC-HA-Biotin，通过HPLC纯化，收率＞85%。

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