文献：EGFR靶向全氟己烷纳米液滴用于分子超声成像

链接：https://www.mdpi.com/2079-4991/12/13/2251

作者：经过 西达尔塔·詹迪亚拉，奥斯汀·范纳门，卡塔利娜-保拉·斯帕塔雷鲁和杰弗里·P·卢克

节选：

全氟己烷纳米液滴合成

全氟碳纳米液滴是使用 Hannah 等人描述的改进的基于超声的方法合成的。[ 27 ]。将 2.2 µmol 的脂质（由 1:0.2:0.03 摩尔比的 DSPE-PEG-2k、DPPC 和 DSPE-PEG-Hz 组成）添加到 50 mL 圆底烧瓶中的 1 mL 氯仿中。使用旋转蒸发仪（德国施瓦巴赫 Heidolph）在 38.5 °C、250 mbar 和 50 rpm 的速度下蒸发溶液以形成脂质饼。对于荧光实验中使用的纳米液滴，在蒸发之前还将 20 µL 1 mg/mL DiD 荧光染料添加到混合物中。

氯仿完全蒸发后，将脂质饼重新悬浮于1 mL去离子水（DI水）中。然后将溶液旋涡（VWR，美国宾夕法尼亚州拉德诺）30 s，并在室温下使用35 kHz超声波水浴式超声波仪（VWR Symphony，美国宾夕法尼亚州拉德诺）进行超声处理1 min。将所得混合脂质溶液转移至冰浴中的20 mL离心管中，并加入50 µL全氟己烷。然后使用微尖探针超声波仪（QSonica，美国康涅狄格州纽敦）以两种不同强度对混合物进行超声处理：一种是低强度（1%功率，1 s开启，5 s关闭，共20个脉冲），另一种是高强度（50%功率，1 s开启，10 s关闭，共5个脉冲）。超声处理后，将纳米液滴在室温下离心（MiniSpin，Eppendorf，德国汉堡）洗涤三次：首先以43 rcf离心60秒，保留上清液；然后以113 rcf离心60秒，再次保留上清液；*后以822 rcf再次离心60秒，弃去上清液，将沉淀物悬浮于1 mL去离子水中，即为*终的PFHnD。采用不同的离心步骤去除较大的颗粒，保留较小的纳米液滴。

离心后，使用动态光散射 (DLS) 法（英国马尔文市 Zetasizer Nano 公司）测定纳米液滴的尺寸和 zeta 电位。所有 DLS 测量均将原液浓度稀释 100 倍。纳米液滴浓度使用内置浓度计算器，根据 DLS 尺寸数据确定。在*体与 PFHnD 偶联之前和之后分别进行了 DLS 和 zeta 电位测量。

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