基本信息
英文名称:Biotin-UTP(Biotinylated Uridine Triphosphate)
化学类别:标记性核苷三磷酸
分子特性:一种将生物素(Biotin)共价连接于尿苷三磷酸(UTP)上的修饰核苷,保留了UTP参与转录、杂交等反应的生物功能,同时引入了可用于亲和纯化、检测或成像的生物素标签。
结构特征
Biotin-UTP 由两个主要结构域组成:
尿苷三磷酸(UTP)部分
这是RNA合成中所需的四种基本核苷三磷酸之一,在转录过程中由RNA聚合酶催化聚合形成RNA链。
生物素(Biotin)部分
生物素是一个小分子维生素(维生素B7),它能被高亲和力蛋白——链霉亲和素(streptavidin)或亲和素(avidin) 特异性结合。Biotin-UTP 通过一个柔性的连接臂将生物素链接在尿苷的5-位或2'-羟基处,确保既不妨碍RNA聚合酶识别,也能在合成后显示其亲和标记能力。
功能与优势
Biotin-UTP 的核心优势在于它兼具核酸功能性与生物素可识别性,主要特点包括:
可用于体外转录反应
生物素-UTP 能被T7、T3、SP6等常用RNA聚合酶识别并掺入RNA链中,实现生物素化RNA探针的制备。
高亲和生物素标签
生物素与链霉亲和素间的强亲和性(非共价但接近共价结合力)使其成为理想的探针固定、纯化、成像工具。
不影响RNA结构稳定性
Biotin的引入通过连接臂避免干扰RNA结构折叠,标记后RNA仍可执行天然功能(如杂交、翻译调控等)。
兼容各种分子生物学反应
可用于qPCR、northern blot、pull-down、流式检测、FISH、RNA原位杂交等。
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