产品名称：FITC-streptavidin，异硫氰酸酯荧光素-链霉亲和素的制备方法

一、FITC-streptavidin的特性

高荧光强度与稳定性：

FITC-streptavidin继承了FITC的强荧光特性，同时由于链霉亲和素的四聚体结构，可结合多个FITC分子，进一步增强荧光信号。

FITC与链霉亲和素的共价结合提高了荧光标记的稳定性，减少了荧光淬灭和脱落。

高亲和力与特异性：

FITC-streptavidin保留了链霉亲和素对生物素的高亲和力，可特异性结合生物素标记的抗体、核酸或其他分子，实现信号的放大和检测。

适用于多种生物检测体系，如ELISA、免疫荧光、流式细胞术等。

生物相容性与低背景：

链霉亲和素具有良好的生物相容性，FITC-streptavidin在生物体内应用时毒性较低，安全性较高。

由于链霉亲和素无糖基化，非特异性结合较少，背景信号低，提高了检测的灵敏度和准确性。

二、FITC-streptavidin的制备方法

FITC-streptavidin的制备通常涉及以下步骤：

链霉亲和素的准备：

从链霉菌中提取链霉亲和素，或通过基因工程技术表达重组链霉亲和素。

纯化链霉亲和素，去除杂质和未结合的配体。

FITC与链霉亲和素的偶联：

将FITC溶解在适当的溶剂中（如DMSO），并稀释至适当浓度。

在碱性条件下（如pH 9.0-9.5的碳酸盐缓冲液），将FITC溶液与链霉亲和素溶液混合，发生共价结合反应。

反应条件需优化，以控制FITC与链霉亲和素的摩尔比，避免过度标记导致链霉亲和素活性下降。

纯化与鉴定：

通过透析、柱色谱或HPLC等方法纯化FITC-streptavidin，去除未结合的FITC和其他杂质。

使用紫外-可见分光光度计测定FITC-streptavidin的吸收光谱，确认FITC的成功标记。

通过SDS-PAGE或Western blot验证链霉亲和素的完整性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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