产品名称：FITC-酪胺，FITC-Tyramide的反应机理与应用

反应机理与应用

1. 酶促信号放大（TSA）

反应类型：过氧化物酶催化酪胺沉积。

条件：

酶：辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）。

底物：FITC-Tyramide、H₂O₂（过氧化氢）。

环境：pH 7.4–8.0，37°C。

机理：

氧化步骤：HRP催化H₂O₂氧化FITC-Tyramide的苯环，生成不稳定的自由基中间体。

共价结合：自由基与邻近蛋白（如抗体、核酸）的酪氨酸残基或细胞膜成分发生共价结合，形成稳定的C-O或C-N键。

信号放大：每个HRP分子可催化数百个FITC-Tyramide分子沉积，显著增强荧光信号。

2. 应用示例

免疫组织化学（IHC）：

步骤1：一抗（特异性抗体）结合目标蛋白。

步骤2：二抗（HRP标记）结合一抗。

步骤3：加入FITC-Tyramide和H₂O₂，HRP催化荧光素沉积，实现高灵敏度成像。

荧光原位杂交（FISH）：

步骤1：探针（DNA/RNA）结合目标序列。

步骤2：HRP标记的适配体结合探针。

步骤3：FITC-Tyramide沉积，增强荧光信号，适用于低丰度靶标检测。

细胞标记：

步骤1：HRP标记的细胞表面受体抗体结合细胞。

步骤2：FITC-Tyramide沉积，实现细胞膜或胞内蛋白的高对比度成像。

3. 优势

高灵敏度：信号放大倍数达100–1000倍，适用于低表达靶标检测。

背景低：共价结合减少非特异性吸附，提高信噪比。

多色成像：可与其他荧光素（如Cy3、Cy5）联合使用，实现多靶标同时检测。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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