产品名称：生物素标记氨基己酸，生物素酰基-6-氨基己酸的合成条件与步骤

合成条件与步骤

1 试剂与材料

生物素（C₁₀H₁₆N₂O₃S）

6-氨基己酸（C₆H₁₃NO₂，纯度≥98%）

EDC（偶联剂）

NHS（稳定剂）

MES缓冲液（pH 5.0，提供适宜的酸性环境）

透析袋（MWCO 1 kDa）或高效液相色谱（HPLC）系统

2 反应条件

缓冲体系：MES缓冲液（pH 5.0），确保羧酸基团的有效活化。

温度与时间：室温（20-25℃）下反应4小时，避光搅拌以防止生物素分解。

试剂浓度：

生物素与6-氨基己酸的摩尔比为1:1。

EDC浓度为10 mM，确保充分活化羧酸基团。

3 合成步骤

活化生物素：

将生物素溶解于MES缓冲液中，加入EDC和NHS，室温下反应30分钟以活化羧酸基团。

偶联反应：

加入6-氨基己酸，继续室温反应4小时，形成酰胺键。

纯化：

透析法：将反应液装入透析袋（MWCO 1 kDa），用PBS缓冲液透析24小时，更换缓冲液3-4次以去除未反应试剂。

HPLC法：使用C18柱进行反向色谱分离，流动相为乙腈-水（含0.1% TFA），检测波长214 nm。

验证：

质谱（MS）：确认产物分子量为454.5 g/mol（与理论值一致）。

核磁共振（NMR）：验证酰胺键的特征峰（δ 7.8-8.0 ppm）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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