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Cy3-HSA,花菁素染料CY3-人血清白蛋白的结构与制备方法
发布时间:2025-08-14     作者:wyh   分享到:

产品名称:Cy3-HSA,花菁素染料CY3-人血清白蛋白的结构与制备方法

结构与制备方法

1.1 化学结构

人血清白蛋白(HSA):

由585个氨基酸组成的单链蛋白,分子量约66.5 kDa,等电点4.7。

结构特点:含35个半胱氨酸残基(其中34个形成17对二硫键),一个游离巯基(Cys34),多个氨基(如赖氨酸残基的ε-氨基)和羧基。

功能:血液中主要的药物和脂肪酸运输载体,具有抗氧化和稳定pH的作用。

Cy3染料:

花菁素类荧光染料,激发波长550-555 nm,发射波长565-575 nm(橙红色荧光)。

结构:含磺酸基团(-SO₃⁻)的阳离子染料,通过NHS酯形式与HSA的氨基结合。

Cy3-HSA复合物:

Cy3的NHS酯与HSA的赖氨酸或半胱氨酸残基的氨基反应,形成稳定的酰胺键(-CONH-),保留HSA的运输功能和Cy3的荧光特性。

1.2 制备方法

活化Cy3:

将Cy3-NHS酯溶解在无水DMSO中,制成浓度约10 mg/mL的溶液。

HSA溶解:

将HSA溶解在pH 7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中,浓度约为1-5 mg/mL。

偶联反应:

将Cy3-NHS溶液缓慢加入HSA溶液中,摩尔比通常为Cy3:HSA=2-5:1。

在室温下避光反应2-4小时,确保充分结合。

纯化:

通过透析(去除未反应的Cy3)或凝胶过滤色谱(如Sephadex G-25)纯化,确保产物纯度≥95%。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

Cy3-HSA,花菁素染料CY3-人血清白蛋白

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