CAS号 150173-73-2
分子量 443.23
分子式 C20H16BF2N3O4S
熔点 N/A
BODIPY 558/568 NHS一种基于BODIPY(硼二吡咯甲烷,boron-dipyrromethene)核心的活性荧光染料衍生物,其羧酸被活化为N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)形式,从而可高效地与含伯胺(—NH₂)功能基的分子共价结合。BODIPY 558/568 NHS 是一款高亮度、光稳定性优异、发射橙红色光的荧光标记试剂,广泛应用于蛋白质、多肽、核酸、纳米材料以及生物传感器的荧光标记和生物成像实验中。其激发峰通常在 558 nm 左右,发射峰约在 568 nm,发射光色彩鲜明,适合多通道荧光实验。
分子结构与化学特性
BODIPY 558/568 NHS 由BODIPY核心染料和NHS活性酯构成。BODIPY染料的核心结构具有高度共轭的平面体系,确保了优异的吸收光谱和高荧光量子产率。通过将羧酸基团转化为NHS酯,染料具备与氨基化分子形成稳定酰胺键的能力,从而实现高效、选择性和定向的生物分子标记。NHS酯在弱碱性条件(pH 7.5–8.5)下与伯胺发生亲核取代反应,生成稳定的共价偶联产物,而反应副产物仅为NHS分子,可通过透析、凝胶过滤或HPLC去除。
光学特性
BODIPY 558/568 NHS 激发峰位于 555–560 nm 区间,发射峰在 565–575 nm,半峰宽窄(约 20 nm),在多通道荧光成像中能显著降低光谱重叠,便于与绿色(如FITC、Cy2)或红色(如Cy5、Alexa 647)荧光染料组合进行多重标记。其高摩尔消光系数(约 8×10⁴–1×10⁵ M⁻¹·cm⁻¹)和高量子产率(0.7–0.9)保证了低浓度下仍能产生明亮荧光信号,同时BODIPY染料的发射几乎不受环境极性和pH变化影响,因此在生物体系中信号稳定可靠。
主要应用
蛋白质和抗体标记
BODIPY 558/568 NHS 可直接与抗体、酶或其他蛋白质中的自由氨基反应,制备高亮度的荧光探针,用于免疫荧光显微镜、流式细胞术(FACS)、Western blot等实验。其窄发射谱使多重荧光标记实验更容易区分不同信号。
多肽和核酸探针修饰
染料可标记氨基化多肽或寡核苷酸,用于FISH(荧光原位杂交)、实时定量PCR探针及分子探针成像。BODIPY的高光稳定性和亮度保证低拷贝量靶标的检测可靠性。
活细胞和亚细胞成像
BODIPY 558/568 NHS 可与靶向配体偶联后用于活细胞成像,包括细胞膜、胞内器官和蛋白质定位的动态观察。其优异光稳定性适合长时间成像实验,如时间序列分析和胞内运输追踪。
纳米材料与表面功能化
染料可通过NHS酯偶联到带氨基的纳米颗粒、量子点、微球、聚合物载体或功能化表面,实现荧光功能化、传感器开发及生物芯片构建。
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