CY5标记的阿魏酸,Cy5-Ferulic-Acid的结构合成
Cy5-Ferulic Acid 是通过将天然酚酸类分子阿魏酸(4-羟基-3-甲氧基-肉桂酸)与花菁染料Cy5偶联得到的荧光衍生物。阿魏酸分子含有芳环羟基、甲氧基以及带羧基的不饱和侧链,可提供多个潜在的修饰点。其中,羧基作为活性位点常用于与Cy5-NHS酯发生酰胺化反应,从而生成稳定的酰胺键。结合后产物兼具阿魏酸的特征与Cy5的近红外荧光性能,吸收峰约646–650 nm,发射在662–670 nm。此类衍生物常用于天然产物标记、药物传递系统示踪、剂分子分布研究及纳米材料表面功能化。
结构合成
底物活化:
阿魏酸分子末端的羧基作为主要修饰点。合成时,首先将阿魏酸溶于无水DMF或DMSO中,在惰性气氛下加入N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)或1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺(EDC),并配合NHS形成活性酯中间体Ferulic-NHS ester。此步骤需在0–4 °C下进行,避免羧基副反应或芳香位点氧化。
连接臂引入(可选):
若需提高溶解性或减小对阿魏酸本体结构的干扰,可先与带伯胺的短链PEG(如H2N-PEG2-OH)反应,得到Ferulic-PEG-NH2 衍生物。该中间体末端带伯胺,有利于后续与Cy5-NHS发生酰胺化。
与Cy5偶联:
在无水DMSO中,Ferulic-PEG-NH2(或直接使用阿魏酸-NHS活化物)与Cy5-NHS酯反应,加入微量有机碱(DIPEA或TEA),室温避光搅拌2–4 h,形成Cy5-Ferulic Acid 偶联物。
若采用点击化学路径,则可在阿魏酸羧基位置接入叠氮或炔基PEG臂,再与Cy5-DBCO或Cy5-N3进行SPAAC/CuAAC反应,生成Cy5-阿魏酸点击衍生物。
纯化:
采用制备型HPLC(C18柱,梯度洗脱,水/乙腈+0.1%甲酸)分离产物,收集目标荧光峰。冻干得到纯化的Cy5-Ferulic Acid,纯度≥95%。必要时可进行透析去除小分子杂质。
表征:
UV-Vis/荧光光谱:确认Cy5特征吸收和发射峰。
质谱(HR-MS):检测分子量增量对应阿魏酸与Cy5的结合。
NMR:在DMSO-d6中观察芳香区与PEG链信号,酰胺键的-CO-NH-质子为重要特征。
HPLC/UPLC:评估纯度和游离染料残留。
产品名称:CY5标记的阿魏酸,Cy5-Ferulic-Acid
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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