CY7.5-D-Alanine，CY7.5标记D-丙氨酸的纯化策略

CY7.5-D-Alanine 是将近红外荧光染料 CY7.5（Cyanine 7.5）与 D-丙氨酸（D-Alanine, D-Ala）通过共价偶联形成的荧光标记氨基酸衍生物。D-丙氨酸是 L-型氨基酸的光学对映体，分子结构简单，包含一个伯胺（–NH2）、羧基（–COOH）和甲基侧链（–CH3），这些功能基团为化学偶联提供了活性位点。CY7.5 作为一种长波长荧光染料，激发波长约 780 nm，发射波长在 800–820 nm 区间，具有高摩尔消光系数、低自发荧光背景和良好的光稳定性。将 CY7.5 修饰在 D-丙氨酸上，既保留了氨基酸的基本化学性质，又赋予其可在近红外光下成像和追踪的能力，为氨基酸衍生物化学研究和生物功能化提供了重要工具。

纯化策略

CY7.5-D-Alanine 的纯化通常采用多步组合方法，以去除未反应的 CY7.5、游离 D-丙氨酸及副产物，确保产物的高纯度和光学性能。常用纯化手段包括：

透析或超滤

将反应体系通过分子量截留膜（如 1–3 kDa）去除小分子未反应染料和缓冲盐。此法适合在水相或水/有机混合溶剂体系中操作，可初步获得纯化的 CY7.5-D-Ala。

高效液相色谱（HPLC）

反相高效液相色谱（RP-HPLC）是获得高纯度产物的核心方法。以 C18 柱为固定相，水-乙腈（含 0.1% 三氟乙酸或甲酸）为流动相，通过梯度洗脱分离游离染料和偶联产物。CY7.5 的长波长吸收使得紫外-可见检测器或近红外荧光检测器可以准确监控分离进程。HPLC 分离后收集主峰，通过冻干或旋转蒸发去除流动相，即可得到高纯度 CY7.5-D-Alanine。

凝胶过滤或凝胶层析

对于中等分子量体系，也可采用凝胶过滤（Sephadex G-10/G-15）进一步去除低分子杂质，尤其在水相体系中效果明显。

表征方法

CY7.5-D-Alanine 的表征主要包括光谱学、质谱和核磁共振等手段，以确认偶联效率、分子结构及荧光性能：

紫外-可见光谱与荧光光谱

测定 CY7.5-D-Alanine 的吸收峰和发射峰，确认染料的光学特性是否保持，同时评估偶联后荧光强度的变化。

质谱分析（ESI-MS 或 MALDI-TOF）

通过质谱确认偶联产物的分子量，验证 CY7.5 已成功连接到 D-丙氨酸，并评估偶联的单分子或多分子情况。

核磁共振（NMR）

^1H NMR 可用于分析 D-丙氨酸的甲基、氨基及羧基环境变化，结合 ^13C NMR 或二维 NMR 进一步验证酰胺键或其他偶联方式的形成。

高性能液相色谱（HPLC）分析

对纯化后的产物进行再分析，以确认峰型单一、纯度高。

CY7.5-D-Alanine 通过上述纯化和表征手段，可获得高纯度、结构明确且光学性能稳定的近红外荧光标记氨基酸衍生物。其应用包括分子探针设计、氨基酸衍生物反应研究、表面功能化及多肽或蛋白标记，为生物化学和化学研究提供了可靠工具。

产品名称：CY7.5-D-Alanine，CY7.5标记D-丙氨酸

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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