Cy7.5-0valbumin，CY7.5标记卵清蛋白的反应步骤

CY7.5-Ovalbumin 是将卵白蛋白（Ovalbumin, OVA）与近红外荧光染料 CY7.5 偶联形成的功能化蛋白。卵清蛋白是一种主要存在于鸡蛋清中的球状蛋白，分子量约 45 kDa，富含赖氨酸残基和 N-端氨基，为化学修饰提供了多个可反应位点。CY7.5 的近红外光学特性使其标记蛋白可用于活体成像、追踪实验及药物载体研究。

CY7.5-Ovalbumin 的典型反应步骤如下：

卵清蛋白的溶液准备

将卵清蛋白溶解于生理缓冲液或碳酸氢盐缓冲液（pH 8.0–8.5），以保持蛋白质构象和活性。蛋白质浓度通常控制在 1–10 mg/mL，以便后续均匀偶联。溶液中可适当添加螯合剂（如 EDTA）以防金属离子影响反应。

CY7.5 活性化处理

CY7.5 通常以 NHS 酯或其他羧基活化形式存在。若为羧酸形式，需通过 EDC/NHS 化学活化生成 CY7.5-NHS 酯中间体，以增强与蛋白氨基的亲核反应能力。活化过程通常在干燥有机溶剂（如 DMSO）中进行，并在低温下保持 30–60 分钟，防止染料降解。

偶联反应进行

将活化的 CY7.5-NHS ester 缓慢加入蛋白溶液中，确保充分搅拌以实现均匀混合。偶联反应依赖于卵清蛋白表面赖氨酸侧链和 N-端氨基的亲核性攻击羧基碳形成稳定的酰胺键。反应通常在室温或 4°C 条件下持续 1–4 小时，以保持蛋白质结构稳定并防止非特异性降解。

反应条件优化

偶联反应的标记度可通过调整染料与蛋白的摩尔比进行精细控制。摩尔比过高可能导致蛋白质构象改变或聚集，摩尔比过低则荧光信号不足。反应 pH 和缓冲盐浓度同样关键，通常使用碳酸氢盐缓冲液或 PBS 进行调节，以确保酰胺化反应效率和蛋白稳定性。

产物纯化

反应结束后，需去除未反应的 CY7.5。常用方法包括透析、凝胶过滤（如 Sephadex G-25）、超滤或高效液相色谱（HPLC）分离。纯化过程保持低温以避免蛋白质变性，同时保留荧光信号强度。

产物表征与储存

纯化后的 CY7.5-Ovalbumin 可通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及 SDS-PAGE 等方法验证标记成功和标记度。典型标记蛋白吸收峰在 780 nm 左右，发射峰在 810 nm 左右。标记蛋白应避光、低温储存（–20°C 干燥或缓冲液冻存），以保持荧光性能和蛋白质稳定性。

综上，CY7.5-Ovalbumin 的反应步骤体现了蛋白溶液准备、CY7.5 活性化、亲核偶联、反应条件优化、产物纯化与表征及储存等关键环节。通过精细控制染料与蛋白的比例和反应环境，可获得荧光强度稳定、结构完整的标记蛋白，适用于活体追踪、细胞成像及生物分子研究。

产品名称：Cy7.5-0valbumin，CY7.5标记卵清蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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