CY7.5-Lysozyme，CY7.5标记溶菌酶的制备方法概述

CY7.5-Lysozyme 是通过将溶菌酶（Lysozyme, 一种存在于鸡蛋白和哺乳动物分泌液中的抗菌酶）与近红外荧光染料 CY7.5 偶联形成的功能化蛋白分子。溶菌酶分子量约 14 kDa，含有多个赖氨酸和半胱氨酸残基，具有水解细菌细胞壁多糖（β-1,4-葡萄糖苷键）的催化能力。CY7.5 偶联赋予其荧光可视化功能，使其在生物研究和成像中可直接追踪。

制备方法概述：

蛋白溶液准备

首先，将纯化溶菌酶溶解于适宜的缓冲液中（如 0.1 M 磷酸盐缓冲液，pH 7.4），浓度通常控制在 1–5 mg/mL，以确保蛋白充分溶解且保持构象。缓冲液应不含初级胺或巯基竞争物，以免干扰后续偶联反应。

CY7.5 活化

CY7.5 荧光染料一般以 NHS 酯或其他活性中间体形式提供，具有高反应性，可与溶菌酶赖氨酸侧链的氨基形成稳定的酰胺键。染料在有机溶剂或缓冲体系中溶解后，即可用于偶联。

偶联反应

将活化 CY7.5 缓慢加入溶菌酶溶液中，控制摩尔比（通常 1:1–1:5，蛋白:染料）以避免过度标记。反应通常在室温下缓慢搅拌 2–4 小时，保持缓冲体系 pH 7–8，以确保酰胺键形成并限度保留酶活性。

纯化与去除游离染料

反应完成后，通过透析、凝胶过滤色谱或超滤去除未偶联的 CY7.5。纯化后的 CY7.5-Lysozyme 可在 PBS 或去离子水中储存，保持稳定性和荧光特性。

表征

偶联产物通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及 SDS-PAGE 检测标记成功。通过酶活性测定可确认溶菌酶催化功能是否保持。理想产物应兼具荧光可视化和酶活性。

特点与应用：

CY7.5-Lysozyme 保留了溶菌酶的抗菌活性，同时可在近红外波段被追踪，用于细胞膜穿透研究、抗菌材料开发及体内/体外成像实验。通过调控染料偶联度，可兼顾荧光强度和蛋白活性，为荧光标记蛋白的实验研究提供可靠工具。

产品名称：CY7.5-Lysozyme，CY7.5标记溶菌酶

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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