产品名称：四嗪聚乙二醇生物素

英文名称：Tetrazine-PEG3400-Biotin

Tetrazine-PEG3400-Biotin 是一种集点击化学活性与生物亲和性于一体的功能化聚乙二醇衍生物，其分子结构包含四嗪基团（Tetrazine）、聚乙二醇链（PEG3400）和生物素（Biotin）三大核心部分，三者的有机结合使其在生物检测、药物研发、分子生物学等领域具有重要的应用意义。

从分子结构与核心特性来看，四嗪基团作为该化合物的点击反应功能单元，具备优异的反应性能。其核心优势在于能与反式环辛烯（TCO）、环辛炔等亲双烯体发生逆电子需求 Diels-Alder（IEDDA）反应，该反应无需金属催化剂参与，在生理环境（如 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液、体温 37℃）下即可快速进行，反应选择性极高，几乎不与生物体内常见的羟基、氨基、羧基等活性基团发生副反应，这一特性使其能在复杂的生物体系中实现精准的分子偶联，为后续的生物分子修饰与相互作用研究提供了可靠的反应基础。聚乙二醇链（PEG3400）的数均分子量约为 3400 Da，其线性柔性链结构赋予化合物良好的水溶性，能有效降低分子的疏水性，避免在水溶液中发生聚集；同时，PEG 链具有出色的生物相容性，能减少化合物在生物体内被免疫系统识别与清除的概率，降低免疫原性与毒性，此外，PEG 链的空间位阻效应还能保护生物素基团免受外界环境干扰，维持其生物活性，确保后续亲和作用的高效进行。生物素（又称维生素 B7、维生素 H）作为关键的生物亲和基团，具有极强的特异性结合能力，其与亲和素（Avidin）、链霉亲和素（Streptavidin）之间的相互作用是生物化学领域中已知最强的非共价相互作用之一，解离常数（Kd）可达 10⁻¹⁵ M，这种高强度、高特异性的结合特性使其成为生物分子分离、检测与靶向递送的理想工具。

在合成工艺方面，Tetrazine-PEG3400-Biotin 的制备需经过多步精准反应与严格纯化，以保证产物的结构完整性与高纯度。合成起始原料通常为端氨基或端羧基 PEG3400，首先进行四嗪基团的引入：若选用端氨基 PEG3400，可将其与活化的四嗪羧酸衍生物（如 4 - 苯基 - 1,2,4,5 - 四嗪 - 3 - 羧酸 N - 羟基琥珀酰亚胺酯，Tetrazine-NHS ester）在无水有机溶剂（如 N,N - 二甲基甲酰胺 DMF、二氯甲烷 DCM）中反应，通过酰胺键将四嗪基团连接到 PEG 链的一端，反应温度一般控制在室温，反应时间为 4-8 小时，期间需通过薄层色谱（TLC）或高效液相色谱（HPLC）监测反应进程；若选用端羧基 PEG3400，则需先将羧基活化（如使用 EDC/DMAP 体系活化生成活性酯），再与含氨基的四嗪衍生物反应，同样形成酰胺键连接。完成四嗪基团的引入后，进行生物素的偶联：将上述得到的 Tetrazine-PEG3400 - 氨基或 Tetrazine-PEG3400 - 羧基中间体与活化的生物素衍生物（如生物素 - NHS ester、生物素 - 酰肼）反应，若中间体为氨基型，则直接与生物素 - NHS ester 通过酰胺键偶联；若中间体为羧基型，则需先活化羧基再与生物素 - 氨基衍生物反应，偶联反应条件与四嗪基团引入反应类似，需控制反应体系的 pH 值（中性至弱碱性条件更利于反应）与温度。反应结束后，采用透析法（选用截留分子量合适的透析袋，如 3000 Da 或 5000 Da）去除未反应的小分子原料（如四嗪衍生物、生物素衍生物）与副产物，透析时间通常为 24-48 小时，期间多次更换透析液以提高纯化效果；随后通过冷冻干燥得到固体产物，最后利用凝胶渗透色谱（GPC）或 HPLC 对产物进行纯度检测，确保纯度达到 95% 以上，满足后续应用需求。

在应用场景方面，Tetrazine-PEG3400-Biotin 凭借其独特的双重功能，在多个领域发挥重要作用。在生物检测领域，可用于免疫检测技术（如 ELISA、免疫印迹 Western Blot）的信号放大：将该化合物通过四嗪 - TCO 反应偶联到抗体或抗原上，利用生物素与链霉亲和素标记的酶（如辣根过氧化物酶 HRP、碱性磷酸酶 AP）的特异性结合，实现检测信号的放大，提高检测的灵敏度与准确性；也可用于流式细胞术分析，通过四嗪基团与 TCO 修饰的细胞表面标志物结合，生物素则与荧光标记的链霉亲和素结合，实现细胞的荧光标记与分选。在药物研发领域，可用于靶向药物递送系统的构建：将四嗪 - PEG3400 - 生物素与 TCO 修饰的药物载体（如聚合物纳米粒、脂质体）偶联，生物素能与肿瘤细胞表面高表达的生物素受体（如癌细胞膜上的生物素转运蛋白）特异性结合，实现药物的靶向递送，减少药物对正常细胞的损伤，提高治疗效果；同时，PEG 链的存在能延长药物载体在体内的循环时间，增加药物在肿瘤部位的富集量。在分子生物学领域，可用于生物分子的分离与纯化：通过四嗪基团与 TCO 修饰的核酸（如 DNA、RNA）或蛋白质偶联，再利用生物素 - 链霉亲和素亲和色谱柱，实现目标核酸或蛋白质的高效分离与纯化，该方法具有分离效率高、特异性强、对生物分子活性影响小等优点；也可用于生物分子相互作用研究，如利用该化合物标记蛋白质，通过生物素与链霉亲和素固定化技术，结合表面等离子体共振（SPR）、等温滴定量热（ITC）等技术，研究蛋白质与其他分子（如配体、核酸）的相互作用动力学与亲和力。

在储存与使用注意事项方面，Tetrazine-PEG3400-Biotin 的稳定性受环境因素影响较大，需严格把控储存条件与使用规范。四嗪基团对强光、高温、强酸强碱环境较为敏感，易发生分解或降解；生物素基团虽相对稳定，但在极端条件下也可能失去生物活性，因此该化合物需储存于密封、避光、干燥的棕色玻璃瓶中，置于 - 20℃冷冻保存，避免反复冻融（反复冻融会导致 PEG 链断裂与四嗪基团分解），建议将其分装成小剂量保存，每次使用取一份，未使用的分装样品需立即放回 - 20℃环境。使用前，需将样品从冷冻环境中取出，在室温下缓慢解冻（可置于冰浴中缓慢融化以减少温度波动），解冻后应尽快使用，若需溶解，应选用合适的溶剂（如无菌水、PBS 缓冲液、DMF 等），溶解过程中轻轻搅拌，避免剧烈震荡导致分子结构破坏；反应体系的 pH 值应控制在 6.0-8.0 之间，以保证四嗪 - TCO 反应的高效性与生物素的亲和活性；反应结束后，若需去除未反应的 Tetrazine-PEG3400-Biotin，可利用生物素 - 链霉亲和素亲和柱进行分离，或通过透析、离心等方法纯化产物。此外，该化合物应避免与强氧化剂、强酸、强碱等物质接触，操作过程中需佩戴手套、护目镜等防护用品，确保实验安全。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年8月30日