Cy7-MAL，CY7马来酰亚胺的纯化方法

Cy7-MAL（Cyanine7-maleimide，CY7-马来酰亚胺）是一种将近红外荧光染料Cyanine7与马来酰亚胺官能团相结合的荧光探针衍生物。其分子设计的核心在于利用马来酰亚胺（maleimide）对巯基（–SH）的高效选择性，使该分子能够与蛋白质、肽段或其他含巯基的小分子在水相条件下迅速形成稳定的硫醚键，从而实现对目标分子的荧光标记。

CY7作为典型的多甲炔链桥接的多环吲哚类近红外染料，具有长波长吸收（740–760 nm）和发射（770–790 nm）特性，能够有效穿透生物组织、降低自发荧光干扰，非常适合于深层成像、体内荧光分布研究以及生物探针的构建。

在结构上，Cy7-MAL包含三个关键模块：①Cyanine7主骨架，即两端为吲哚或苯并吲哚环，中间由七元多甲炔链连接的多共轭体系，该部分决定了染料的光谱性质；②连接臂，一般为柔性的短PEG链或烷基链，使荧光团与反应活性基团之间保持一定距离，减少偶联过程中空间位阻与荧光淬灭；③马来酰亚胺基团，通常通过酰胺键或酯键与连接臂相连，提供与巯基的特异反应位点。这样的模块化设计确保了CY7的光学性质在修饰后保持稳定，同时赋予了其良好的化学反应活性与选择性。

合成路线一般包括以下几个步骤：首先，以CY7羧酸或CY7-NHS酯为前体染料，通过活化羧基实现与含氨基的连接臂偶联。例如，采用CY7-NHS酯与氨基化的PEG-maleimide或氨基-烷基-maleimide反应，在无水有机溶剂（如DMF、DMSO）中进行，并添加有机碱（DIPEA、TEA）促进酰胺键形成。该步骤生成稳定的Cy7-MAL产物。另一种常见策略是先合成带有自由氨基的中间体（如Cy7-PEG-NH2），再与马来酰亚胺酸酐（maleic anhydride）反应，生成马来酰亚胺修饰物。整个反应过程需在避光条件下进行，以防止CY7染料光降解。

纯化方法通常采用反相高效液相色谱（RP-HPLC），利用乙腈/水体系梯度洗脱，目标产物可通过紫外-可见检测器在750 nm处监测到特征峰。冻干或旋干后得到纯净的Cy7-MAL粉末。表征方面，质谱（ESI-MS、MALDI-TOF）用于确认分子量与目标结构一致，核磁共振（^1H NMR、^13C NMR）可验证连接臂与马来酰亚胺部分的化学环境，紫外-可见光谱与荧光光谱则确认其光学性质保持不变。

Cy7-MAL的设计优势在于反应条件温和（pH 6.5–7.5）、选择性高（几乎只与巯基反应）、生成产物稳定（硫醚键不易断裂），非常适合与含半胱氨酸的蛋白质或小分子修饰物偶联。其在生物体系中能够实现高效的荧光标记，用于细胞膜蛋白、受体分子或含巯基纳米材料的荧光示踪。同时，柔性连接臂还减少了荧光淬灭与蛋白构象干扰，保证了标记分子的功能活性与光学性能。

总结而言，Cy7-MAL是一类重要的巯基专一性近红外荧光探针，结合了CY7优越的光学性质与马来酰亚胺的高选择性化学反应特性。通过合理的结构设计与合成步骤，可获得高纯度、高稳定性的标记试剂，为蛋白质修饰、分子探针构建及体内外成像提供了有力工具。

产品名称：Cy7-MAL，CY7马来酰亚胺

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09