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AF488 标记刀豆蛋白 A Con A,AF488 标记刀豆蛋白 A
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:

产品名称:AF488 标记刀豆蛋白 A Con A,AF488 标记刀豆蛋白 A

AF488 标记刀豆蛋白 A(AF488-Con A)是生物医学研究中常用的荧光探针复合物,由刀豆蛋白 A(Concanavalin A,简称 Con A)与 Alexa Fluor 488(AF488)荧光染料通过化学偶联形成,兼具 Con A 的生物学识别特性与 AF488 优异的荧光性能,在细胞生物学、分子生物学及医学诊断领域应用广泛。


刀豆蛋白 A 是从刀豆属植物(如刀豆)中提取的一种凝集素,属于金属依赖型糖结合蛋白,其核心生物学功能是特异性识别并结合细胞表面或生物分子中的 α-D - 甘露糖和 α-D - 葡萄糖残基。这种糖结合特性使其成为研究糖蛋白、糖脂等糖基化生物分子分布与功能的关键工具 —— 例如,细胞表面的糖萼结构富含上述糖残基,Con A 可通过与这些糖残基的特异性相互作用,实现对细胞表面糖基化修饰的靶向结合。此外,Con A 还具有促进细胞凝集、激活免疫细胞(如 T 淋巴细胞)等生物学活性,在免疫机制研究和细胞间相互作用分析中也有重要价值。


Alexa Fluor 488(AF488)则是 Invitrogen 公司开发的一种高性能荧光染料,属于荧光素类衍生物,但其光学性能和化学稳定性显著优于传统荧光素。AF488 的最大激发波长约为 495 nm,最大发射波长约为 519 nm,发射明亮的绿色荧光,与常见的荧光显微镜滤光片系统(如 FITC 滤光片)兼容性良好,便于实验操作。同时,AF488 具有极高的荧光量子产率(约 0.92),能在低浓度下产生强荧光信号,降低探针用量并减少对生物样本的潜在毒性;其抗光漂白能力强,可耐受长时间的激光照射,适合长时间动态观察实验(如活细胞糖基化动态变化监测);此外,AF488 在广泛的 pH 范围(pH 4.0-8.0)内荧光信号稳定,不受生物样本内 pH 波动的显著影响,确保实验结果的可靠性。


在化学偶联方面,AF488 通常通过活性酯(如 NHS 酯)形式与刀豆蛋白 A 分子上的氨基(主要来自赖氨酸残基)发生酰胺化反应,形成稳定的共价键,实现荧光染料与蛋白的偶联。偶联过程中需严格控制 AF488 与 Con A 的摩尔比例,通常为 3-5 个染料分子偶联到一个 Con A 分子上 —— 比例过低会导致荧光信号强度不足,影响检测灵敏度;比例过高则可能因染料分子间的空间位阻或疏水相互作用,破坏 Con A 的空间结构,导致其糖结合活性下降。偶联完成后,需通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25 层析柱)等方法去除未偶联的游离 AF488,获得高纯度的 AF488-Con A 复合物,避免游离染料对荧光信号的干扰。


在应用场景中,AF488-Con A 最核心的用途是细胞表面糖基化分析。例如,在荧光显微镜观察中,将 AF488-Con A 与活细胞或固定细胞共孵育后,复合物可通过 Con A 与细胞表面 α-D - 甘露糖 /α-D - 葡萄糖残基的结合,实现对细胞表面糖萼的荧光标记,通过绿色荧光信号的分布和强度,直观观察不同细胞系(如正常细胞与肿瘤细胞)表面糖基化水平的差异 —— 研究表明,肿瘤细胞常发生糖基化异常(如甘露糖残基表达上调),AF488-Con A 可作为肿瘤细胞糖基化异常的检测探针,为肿瘤诊断和分型提供依据。此外,在流式细胞术分析中,AF488-Con A 可对细胞进行荧光标记,通过流式细胞仪定量检测不同细胞群体的荧光强度,实现细胞表面糖基化水平的高通量分析,适用于大规模细胞样本的筛选(如药物处理后细胞糖基化变化的批量检测)。


在分子生物学领域,AF488-Con A 还可用于糖蛋白的分离与定位。例如,在 Western blot 实验中,将 AF488-Con A 作为检测探针,可与膜上的糖蛋白(如受体蛋白、酶类)特异性结合,通过荧光成像直接检测糖蛋白的表达情况,无需传统的抗体 - 酶联反应,简化实验流程并缩短检测时间;在免疫荧光共定位实验中,AF488-Con A 可与特异性识别目标蛋白的荧光抗体(如红色荧光标记的抗体)联合使用,通过共聚焦显微镜观察绿色荧光(糖基化结构)与红色荧光(目标蛋白)的重叠程度,分析目标蛋白的糖基化修饰状态及其在细胞内的定位关系。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

AF488 标记刀豆蛋白 A

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小编:HLL 2025年9月4日

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