产品名称：Alexa Fluor594 标记膜联蛋白 V

英文名称：AF594-Annexin V

AF594-Annexin V 是生物医学研究中用于检测细胞凋亡的核心荧光探针，由膜联蛋白 V（Annexin V）与 Alexa Fluor 594（AF594）荧光染料偶联而成，利用 Annexin V 对磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）的特异性结合能力，结合 AF594 明亮的红色荧光信号，实现对细胞凋亡过程的高灵敏度、可视化检测，广泛应用于细胞生物学、肿瘤学、药理学等领域。

首先，膜联蛋白 V（Annexin V）是一类钙依赖性磷脂结合蛋白家族的成员（主要为 Annexin A5），其分子质量约为 35-36 kDa，核心生物学特性是在 Ca²⁺存在的条件下，能与生物膜上的磷脂酰丝氨酸（PS）发生高度特异性、高亲和力的结合。在正常活细胞中，PS 作为细胞膜磷脂双分子层的重要组成部分，主要分布在细胞膜的内侧面（靠近细胞质的一侧），这种不对称分布由细胞膜上的磷脂翻转酶（如 flippase）维持，可防止 PS 与细胞外环境中的分子发生相互作用。而当细胞发生凋亡（程序性细胞死亡）时，细胞内的信号通路会激活磷脂 scramblase 等酶类，破坏细胞膜的磷脂不对称性，导致 PS 从细胞膜内侧面翻转到外侧面（暴露于细胞外环境）—— 这一变化是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞形态学改变（如细胞皱缩、染色质凝聚）和细胞膜完整性破坏之前，是检测早期凋亡的理想靶点。Annexin V 正是通过识别凋亡细胞表面暴露的 PS，成为凋亡检测的特异性分子工具。

其次，Alexa Fluor 594（AF594）是一种高性能的红色荧光染料，属于罗丹明类衍生物，其光学性能经过优化，专为生物样本荧光标记设计。AF594 的最大激发波长约为 590 nm，最大发射波长约为 617 nm，发射强烈的红色荧光，与常见荧光显微镜的罗丹明（Rhodamine）或 Texas Red 滤光片系统完全兼容，便于实验操作和信号采集。相较于传统红色荧光染料（如罗丹明 B、Cy3），AF594 具有显著优势：其一，荧光量子产率高（约 0.65），在低浓度下即可产生强荧光信号，降低探针用量，减少对细胞的潜在毒性，尤其适合活细胞凋亡检测；其二，抗光漂白能力极强，可耐受长时间的激光照射（如共聚焦显微镜的激光扫描），适合动态观察细胞凋亡的进程（如追踪单个细胞从早期凋亡到晚期凋亡的变化）；其三，荧光信号在生理 pH 范围（pH 4.5-8.5）内高度稳定，不受细胞内 pH 波动的影响，确保不同凋亡阶段细胞荧光信号的准确性；其四，AF594 的光谱与其他常用荧光染料（如绿色荧光的 AF488、蓝色荧光的 DAPI）重叠度低，便于多色荧光共标记实验（如同时检测凋亡细胞与细胞内特定蛋白的表达）。

在化学偶联工艺上，AF594 通常以活性酯（如 NHS 酯，N - 羟基琥珀酰亚胺酯）的形式与 Annexin V 分子上的氨基（主要来自赖氨酸残基的 ε- 氨基）发生酰胺化反应，形成稳定的共价键，实现荧光染料与蛋白的偶联。偶联过程中需严格控制反应条件（如 pH 值、温度、染料与蛋白的摩尔比例）：pH 通常控制在 7.2-7.5（接近生理 pH，避免蛋白变性），温度维持在室温（20-25℃），AF594 与 Annexin V 的摩尔比一般为 2-4:1—— 比例过低会导致荧光信号强度不足，影响检测灵敏度；比例过高则可能因染料分子的空间位阻效应，破坏 Annexin V 与 PS 结合的活性位点，导致其结合特异性下降。偶联反应完成后，需通过凝胶过滤层析（如 Sephadex G-25 或 Superdex 75 层析柱）去除未偶联的游离 AF594，同时采用离心超滤等方法纯化产物，确保 AF594-Annexin V 复合物的纯度（通常要求纯度＞95%），避免游离染料对荧光信号的干扰，保证实验结果的可靠性。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月4日