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AF350 标记链霉亲和素偶联物,AF350 标记链霉亲和素偶联物
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:

产品名称:AF350 标记链霉亲和素偶联物,AF350 标记链霉亲和素偶联物

AF350 标记链霉亲和素偶联物是一类以蓝色荧光为信号输出的生物探针,其设计理念围绕 AF350 荧光染料的独特光学特性与链霉亲和素的高特异性结合能力展开,在需要多色荧光分析或蓝色通道检测的实验场景中具有不可替代的优势。从核心组成来看,该偶联物的两大功能模块分工明确:AF350 荧光染料作为蓝色荧光家族的重要成员,具有特定的光学参数,其激发波长约为 343nm,发射波长约为 441nm,虽然相较于绿色或红色荧光染料,其荧光量子产率略低,但在蓝色光谱区域能有效避免生物样本自身荧光( autofluorescence )的干扰 —— 生物样本中的内源性物质(如胶原蛋白、NADPH)通常在绿色至红色光谱区域有较强自发荧光,而在蓝色区域自发荧光较弱,这使得 AF350 标记的探针在生物成像中能获得更高的信噪比;链霉亲和素部分则保持了其经典特性,分子质量约 60kDa,四聚体结构赋予其四个生物素结合位点,结合亲和力极强(Kd≈10-15mol/L),且结合过程快速、可逆性低,能在复杂生物环境(如细胞裂解液、组织匀浆)中精准识别并结合生物素标记的靶分子,为靶向检测提供坚实基础。


在制备技术层面,AF350 标记链霉亲和素偶联物的生产需兼顾染料的光学活性与蛋白质的生物活性。常用的偶联策略包括氨基偶联和巯基偶联:氨基偶联主要利用 AF350 分子上修饰的活性酯基团(如 NHS 酯),与链霉亲和素表面赖氨酸残基的 ε- 氨基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键;巯基偶联则针对链霉亲和素经化学修饰后引入的巯基(如通过二硫苏糖醇 DTT 还原二硫键获得),通过 AF350 上的马来酰亚胺基团与之发生加成反应,形成硫醚键。制备过程中,需重点控制两个关键参数:一是染料 / 蛋白质摩尔比(D/P 比),通常控制在 2-4:1,若 D/P 比过高,过多的染料分子修饰可能导致链霉亲和素的空间构象改变,破坏其生物素结合位点,降低结合活性;若 D/P 比过低,则荧光信号强度不足,影响检测灵敏度,因此需通过紫外 - 可见分光光度法或荧光分光光度法精准测定 D/P 比,确保产物性能达标;二是反应环境,偶联反应通常在温和的缓冲液体系(如 pH 7.2-7.4 的 PBS 缓冲液)中进行,温度控制在室温(20-25℃),反应时间根据试剂浓度调整为 1-2 小时,避免极端 pH 值或高温导致蛋白质变性。纯化阶段则多采用尺寸排阻色谱(如 Sephadex G-25 凝胶柱),利用分子质量差异分离偶联物与游离 AF350 染料,同时通过透析去除反应过程中产生的小分子杂质,保证最终产物的纯度大于 95%,减少非特异性信号干扰。


在应用领域方面,AF350 标记链霉亲和素偶联物凭借其蓝色荧光的独特优势,在多色荧光免疫分析、荧光原位杂交(FISH)、流式细胞术多参数检测及生物传感器构建中应用广泛。在多色荧光免疫分析中,当需要同时检测多种靶标分子时,该偶联物可与发射绿色、红色荧光的探针(如 AF488、AF594 标记探针)搭配使用,通过不同光谱通道的信号采集实现多靶标同步检测,例如在肿瘤标志物联合检测中,可分别用 AF350、AF488、AF594 标记针对不同肿瘤抗原的生物素化抗体,同时识别癌细胞表面的多种标志物,为肿瘤分型和预后评估提供更全面的信息;在荧光原位杂交中,它可用于染色体或基因片段的定位分析,由于蓝色荧光在细胞核背景中的干扰小,能更清晰地显示杂交信号的位置,辅助研究基因扩增、缺失或易位等染色体异常现象;在流式细胞术多参数检测中,其蓝色荧光信号可与其他荧光通道(如 FITC、PE 通道)的信号区分开,实现对细胞表面多种分子的同时分析,例如在免疫细胞亚群分析中,可结合 AF350 标记链霉亲和素偶联物与其他荧光抗体,精准识别 T 细胞、B 细胞、巨噬细胞等不同亚群,并分析其表面标志物的表达水平;在生物传感器构建中,将该偶联物固定于传感器芯片表面,利用链霉亲和素与生物素的特异性结合,可实现对生物素标记的靶标分子(如核酸、蛋白质、小分子药物)的高灵敏度检测,其蓝色荧光信号可通过荧光分光光度计或共聚焦显微镜进行定量读取,为临床诊断和药物筛选提供快速检测手段。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

350 标记链霉亲和素偶联物

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小编:HLL 2025年9月4日

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