CY7-Vancomycin,CY7标记万古霉素的合成步骤概述
CY7标记万古霉素(CY7-Vancomycin)是一种将近红外荧光染料CY7共价连接到万古霉素分子上的功能性复合物。万古霉素是一种复杂的糖肽类抗生素,由多环肽骨架和糖基侧链组成,具有高度特异性的分子识别能力,可与靶向分子(如肽聚糖)形成稳定结合。通过CY7标记,万古霉素获得了近红外荧光信号,可用于分子示踪、药物动力学研究及化学研究,而不影响其核心识别功能。
CY7-Vancomycin的合成基于CY7活性衍生物与万古霉素分子中可反应官能团的共价偶联。CY7通常以NHS酯、马来酰亚胺或其他可反应基团形式存在,可与万古霉素的游离胺基或羟基反应形成稳定的酰胺键或酯键。在偶联设计中,通常选择万古霉素糖基或羟基末端作为标记位点,以避免破坏其关键抗原结合位点,从而保证复合物的生物功能。
合成步骤概述如下:
原料准备
首先,万古霉素以盐酸盐或游离形式溶解在适当缓冲液(如PBS或碳酸氢盐缓冲液)中,pH调控在7.5–8.5之间,以保证胺基活性且维持分子结构稳定。同时,CY7活性衍生物(如CY7-NHS酯)溶解于适当的有机溶剂(如DMSO)中,以避免水解。
偶联反应
将CY7活性衍生物缓慢加入万古霉素溶液中,轻轻搅拌,使CY7分子与万古霉素游离胺基或羟基发生亲核取代或加成反应,生成稳定的酰胺或酯共价键。反应一般在室温或37°C下进行数小时至十余小时。反应中可控制CY7与万古霉素的摩尔比,确保标记密度适中,既保证荧光信号,又避免过度修饰导致分子聚集或活性损失。
反应监控与初步纯化
通过紫外-可见光谱或薄层色谱(TLC)可监测CY7标记的形成。待反应完成后,可使用透析、超滤或小分子去除法去除未反应的CY7-NHS酯及低分子副产物。此步骤可初步获得水溶性较好的CY7-Vancomycin复合物。
高效液相色谱(HPLC)纯化
为获得高纯度产物,通常采用反相C18 HPLC进行精制。梯度洗脱分离可有效区分CY7标记的万古霉素与未标记物及副产物,通过检测近红外吸收峰(约750 nm)进行收集。纯化后产物可冻干或溶解在缓冲液中保存。
表征与功能验证
纯化后的CY7-Vancomycin通过UV-Vis光谱和荧光光谱确认标记效率及光学性质,同时可通过质谱(MS)或HPLC分析分子量及纯度。功能验证包括靶分子结合实验,确保偶联未破坏万古霉素的核心识别能力。
通过以上步骤,CY7-Vancomycin实现了荧光标记与生物功能的平衡,复合物在化学研究、药物递送追踪及分子示踪实验中表现出良好的稳定性和可视化特性。其近红外发射特性可减少背景干扰,便于体外及体内高灵敏度检测。
产品名称:CY7-Vancomycin,CY7标记万古霉素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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