CY7-Snailase，CY7标记蜗牛酶的合成过程研究

CY7标记蜗牛酶（CY7-Snailase）是一种将近红外荧光染料CY7通过共价偶联标记在蜗牛酶（Snailase）分子上的复合物。蜗牛酶是一类来源于蜗牛消化系统的复合酶，主要具有糖苷水解活性，可分解多糖底物，如纤维素、淀粉和半纤维素。通过CY7标记，蜗牛酶获得近红外荧光特性，使其在生物成像、酶动力学研究及复合体系示踪中具备可视化能力，同时保持酶的生物活性。

合成过程研究的核心目标是在保证蜗牛酶活性的前提下，实现高效、可控的CY7偶联。CY7常以NHS酯或马来酰亚胺衍生物形式存在，可与蜗牛酶分子上的氨基或巯基反应形成稳定的共价键。蜗牛酶表面富含赖氨酸残基及少量半胱氨酸，为CY7提供了偶联位点。通过合理选择偶联位点和调控标记密度，可避免荧光染料对酶空间结构和活性位点的干扰。

合成过程研究的主要步骤包括：

蜗牛酶制备与缓冲体系优化

蜗牛酶通常溶解于中性或弱碱性缓冲液（如PBS或碳酸盐缓冲液），pH控制在7.0–8.5，以保持蛋白质的构象和酶活性。缓冲液中避免使用强还原剂或高浓度有机溶剂，以防巯基氧化或蛋白质变性。

CY7活性衍生物准备

CY7-NHS酯或CY7马来酰亚胺需溶解于少量DMSO或DMF中，以提高溶解度并避免水解。溶液应在避光条件下准备，防止染料光降解。

偶联反应

将CY7活性衍生物缓慢加入蜗牛酶溶液中，轻轻搅拌以确保均匀反应。亲核氨基或巯基攻击CY7活性基团的羰基碳，形成酰胺键或硫醚键。反应温度通常控制在室温或略低（约25–30°C），反应时间为数小时至十余小时。研究过程中，通过调控CY7与蜗牛酶摩尔比，可获得不同标记密度的产物，用于探索荧光信号强度与酶活性之间的平衡。

反应监控与过程优化

偶联过程中，可通过UV-Vis光谱监测CY7吸收峰（约750 nm）出现情况，同时可进行荧光测定以评估标记效率。酶活性可采用底物水解实验进行定量，评估偶联是否影响功能。通过调整pH、温度和反应时间，可优化偶联条件，实现高效率与活性保留的双重目标。

纯化与副产物去除

偶联反应完成后，体系中可能存在未反应的CY7、低分子副产物及少量聚集体。常用方法包括透析、超滤及凝胶过滤层析，去除低分子杂质并富集CY7-Snailase。纯化过程中注意避光操作，防止CY7光降解，同时控制温度保持酶活性。

表征与功能验证

纯化后的CY7-Snailase通过UV-Vis光谱、荧光光谱及HPLC分析标记效率与纯度。酶活性通过底物水解实验验证，确保偶联未破坏酶催化功能。此外，可通过动态光散射（DLS）或SDS-PAGE结合荧光扫描分析产物分子量及均一性。

合成过程研究的意义在于系统优化CY7与蜗牛酶偶联条件，实现荧光信号、酶活性和化学稳定性三者兼顾。CY7-Snailase在化学研究中可用于底物动力学追踪、酶分布示踪及复合体系构建，为酶工程、药物递送及生物成像研究提供可靠实验基础。

产品名称：CY7-Snailase，CY7标记蜗牛酶

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

CY5-骨桥蛋白

CY2-Agarose

Cy2-琼脂

CY2-Rosmarinic acid迷迭香酸

CY5-Sodium

cholate

CY5-胆汁酸

CY5-2-Hydroxyethyl

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09