ICG-Transferrins，吲哚菁绿标记转铁蛋白的合成步骤概述

ICG-Transferrins（吲哚菁绿标记转铁蛋白）是一种将近红外荧光染料吲哚菁绿（Indocyanine Green, ICG）与血浆蛋白转铁蛋白（Transferrin, Tf）结合形成的功能性复合物。该复合物融合了ICG的深组织荧光成像能力和转铁蛋白的靶向特性，能够特异性识别和结合细胞膜上的转铁蛋白受体，从而在药物递送、细胞标记及生物成像中具有应用。ICG-Transferrins的合成通常采用温和的化学偶联策略，保持蛋白活性及荧光性能，同时构建稳定的功能化分子。

1. 分子组成与特性

ICG染料

ICG是一种共轭吲哚类染料，具有磺酸基团增加水溶性，吸收峰约780 nm、发射峰约810 nm。其分子结构包含活性羧基或活化衍生物（ICG-NHS、ICG-MAL），可与蛋白氨基或巯基形成共价键，实现稳定偶联。

转铁蛋白（Tf）

转铁蛋白是一种单体血浆蛋白，分子量约80 kDa，具有铁离子结合位点和多肽链上的赖氨酸、半胱氨酸等可反应基团。Tf能够通过受体介导特异性结合细胞膜铁转运受体，实现靶向递送。

偶联策略

ICG与Tf结合时常采用活性羧基或马来酰亚胺基团，通过赖氨酸或半胱氨酸残基进行温和的化学偶联，并可利用PEG链或短链间隔分子调控空间结构，避免荧光猝灭及蛋白构象破坏。

2. 合成步骤概述

ICG-Transferrins的制备通常包括以下关键步骤：

ICG活化

选择ICG-NHS或ICG-MAL作为偶联前体，使羧基或巯基活化。

将ICG在缓冲溶液（pH 7.4–8.5）或含少量有机溶剂的水溶液中溶解，保持避光条件，防止光降解。

蛋白预处理

转铁蛋白在PBS缓冲液中溶解，调节pH以使赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基处于可反应状态。

可选择性保护敏感氨基酸残基，以保持蛋白功能性位点。

偶联反应

将活化ICG缓慢加入转铁蛋白溶液中，搅拌反应。

反应温和控制在室温至37℃，时间通常数小时至过夜，以确保充分偶联同时避免蛋白降解。

在此过程中，ICG通过酰胺键或硫醚键稳定地连接到Tf分子上，形成ICG-Tf复合物。

纯化与去除未反应物

反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱去除游离ICG，获得纯净复合物。

浓缩和缓冲液更换可调节复合物浓度及生理适用性。

表征与功能验证

紫外-可见光谱和荧光光谱用于确认ICG偶联及荧光性能。

SDS-PAGE和质谱分析验证蛋白偶联情况及分子量变化。

受体结合实验可评估Tf靶向能力是否保持。

3. 合成特点与优势

温和条件保持生物活性

反应在生理pH和温和温度下进行，保持Tf蛋白构象及受体结合功能。

稳定共价偶联

ICG与Tf形成酰胺键或硫醚键，使荧光分子牢固连接蛋白表面，减少ICG脱离或光漂白风险。

功能整合

ICG提供近红外荧光成像能力，Tf赋予靶向识别能力，实现“可视化+靶向递送”复合功能。

可调控偶联密度

通过调节ICG与Tf摩尔比，可控制复合物荧光强度和蛋白功能位点保护，保证成像信号与生物活性兼顾。

多用途平台

ICG-Tf复合物可进一步与药物、纳米载体或抗体结合，构建多功能递送体系，用于细胞标记、体内分布追踪及药物递送研究。

4. 应用前景

ICG-Transferrins复合物利用Tf受体介导的靶向能力与ICG荧光成像特性，可应用于：

体内近红外成像：追踪药物、纳米载体或靶向分子在组织内分布。

靶向药物递送：结合药物分子，实现“靶向+可视化”递送。

细胞标记与：利用Tf受体介导特异性结合，实现细胞或组织标记。

产品名称：ICG-Transferrins，吲哚菁绿标记转铁蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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