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Atto 425-N-羟基琥珀酰亚胺酯（Atto 425 NHS酯）是一种高性能的荧光染料衍生物，属于水溶性蓝色荧光标记试剂，广泛应用于生物化学、分子生物学及化学分析领域。其结构特点是将 Atto 425 荧光核心与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯活性基团相结合，使其能够通过共价键与蛋白质、肽链或其他含氨基的生物分子高效标记。

化学结构与性质

Atto 425-NHS酯的化学结构主要由以下部分组成：

荧光核心：Atto 425 荧光染料核心为共轭体系，具有蓝色荧光发射特性。其分子结构稳定，光化学性能优异，可在多种溶液和缓冲体系中保持高荧光强度。

活性基团：N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）通过酰化方式与染料核心连接，形成易于与一级氨基（如蛋白质赖氨酸残基或多肽氨基末端）反应的活性中间体。NHS 酯能在轻微碱性条件下高效生成共价酰胺键，实现稳定标记。

侧链与水溶性修饰：Atto 425-NHS酯经过化学改性，使其在水相环境中溶解性良好，同时减少非特异性吸附和自聚集现象，保证标记实验的准确性。

标记与应用

蛋白质和多肽标记：Atto 425-NHS酯通过 NHS 酯与蛋白质赖氨酸侧链或多肽氨基末端形成共价酰胺键，实现高效标记。标记后的蛋白质可用于荧光免疫分析、Western blot、ELISA 等实验。

免疫学检测：在免疫荧光实验中，Atto 425 标记抗体能够提供蓝色荧光信号，用于多重荧光检测和共定位研究。其光稳定性和高亮度确保在显微镜下的长期观察。

生物成像与分子探针：通过标记生物分子，Atto 425-NHS酯可用于细胞成像、膜蛋白追踪、核酸标记以及荧光探针设计。其高光稳定性和亮度使其在活细胞成像中表现优异。

化学与分析研究：作为高性能荧光探针，Atto 425-NHS酯可用于分子间相互作用研究、酶活性分析以及荧光传感器构建。