CY5-lnulin,花菁染料CY5标记菊粉的纯化过程
菊粉(Inulin)是一类存在于菊科植物中的可溶性多糖,主要由β-(2→1)果糖残基构成,并通常以一个葡萄糖单元为还原端。其分子结构中富含羟基,具有良好的亲水性与生物相容性,常被用作药物载体、可降解支架以及食品添加剂。将菊粉修饰上花菁染料Cy5,可构建具有近红外荧光特性的多糖探针,兼具荧光成像与药物递送的潜力。
合成Cy5-Inulin的过程主要围绕羟基的活化与染料的偶联展开。通常的研究步骤如下:
前体活化:
菊粉分子中羟基反应活性较低,因此首先需要将羟基引入可反应基团。常见方法是采用对甲苯磺酰氯(TsCl)或碳二亚胺类试剂(EDC/NHS)对还原端或部分羟基进行活化,形成可与氨基反应的中间体。另一种方法是通过引入氨丙基或氨乙基连接臂,将羟基转化为伯胺,从而增加与Cy5活性酯的反应可能性。
Cy5活性染料制备:
选用Cy5-NHS ester或Cy5-COOH作为染料前体。若使用Cy5-COOH,则需在EDC/NHS体系下活化形成Cy5-NHS ester,以确保其能够与菊粉的氨基或修饰位点快速结合。
偶联反应:
将活化的菊粉衍生物与Cy5-NHS ester溶解于无水DMF或DMSO中,添加适量有机碱(如DIPEA),在室温或轻微升温条件下搅拌反应。反应时间通常为4–24小时,具体取决于修饰位点数量和空间位阻。此步骤中需要控制反应比,以避免菊粉上过度标记,导致溶解性下降或结构塌陷。
纯化过程:
反应产物一般采用透析袋(MWCO 3–10 kDa)去除小分子Cy5及副产物,或通过凝胶渗透色谱(GPC)分离不同修饰度的菊粉。经冷冻干燥后得到Cy5-Inulin固体产物。
表征:
通过紫外-可见光谱检测Cy5在646 nm的特征吸收峰,从而确认标记成功。荧光光谱用于测试其在近红外区域的发射特性(约662 nm)。红外光谱可验证菊粉羟基修饰与酰胺键的形成。核磁共振(^1H NMR,^13C NMR)进一步证明修饰位置与修饰度。凝胶渗透色谱可分析产物分布,质谱(MALDI-TOF)则适用于低分子量菊粉衍生物的分子质量确认。
通过这一合成路线,Cy5-Inulin兼具多糖的良好溶解性与生物相容性,同时具有光学荧光信号,适用于体内外成像、药物载体标记及多糖功能化研究。其合成过程研究重点在于优化活化方式、控制修饰度及纯化分离,以保证产物稳定性与均一性。
产品名称:CY5-lnulin,花菁染料CY5标记菊粉
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09