CY5-PLL,花菁染料CY5标记聚赖氨酸的结构表征
聚赖氨酸(Poly-L-lysine, PLL)是一种由赖氨酸残基线性聚合而成的阳离子多肽,因其主链氨基与侧链ε-氨基的高密度分布,具有优异的反应活性与生物降解性,被用于基因递送载体、表面涂层及细胞培养材料。将其与近红外荧光染料Cy5偶联,可获得兼具正电荷调控与荧光探针功能的多肽材料。
Cy5-PLL的结构合成通常包括以下关键步骤:
前体选择:
以不同分子量的PLL作为基础骨架,常见范围在1–30 kDa。分子量不同决定了链长、氨基数量及终标记密度,从而影响其物理化学性质与生物相容性。
活性染料制备:
选用Cy5-NHS ester作为标记染料。由于PLL分子中氨基丰富,NHS酯形式能与氨基快速发生酰胺化反应,生成稳定的酰胺键。若需要后续进一步功能化,也可选择Cy5-Mal或Cy5-Azide,以引入点击化学反应位点。
偶联反应:
在PBS缓冲液(pH 7.4–8.5)或无水DMSO/DMF体系中,将PLL溶解并缓慢加入Cy5-NHS ester。通过控制Cy5与赖氨酸残基摩尔比,可调节标记程度,常见修饰度为1–10%。反应条件一般为室温下搅拌数小时。
纯化:
偶联完成后,通过透析袋(MWCO 3–10 kDa)去除未结合的Cy5小分子,也可采用凝胶过滤柱分离。终产物经冷冻干燥得到红色或紫色固体,溶于水后呈现荧光信号。
结构表征:
UV-Vis光谱可验证Cy5在646 nm的特征吸收峰。荧光光谱用于测定其近红外发射(约662 nm)。傅立叶红外光谱(FTIR)可确认酰胺键的生成。核磁共振(^1H NMR)则可检测聚合物主链与染料芳香氢的信号变化,进一步说明偶联成功。SDS-PAGE或GPC有助于分析产物的分子量分布。
结构特点:
Cy5-PLL的主链由聚赖氨酸提供正电荷,可与DNA、RNA或其他阴离子分子通过静电作用结合;侧链的部分氨基被Cy5修饰,赋予荧光特性。其整体结构为线性多肽链段上随机分布的染料修饰点,既保留了聚赖氨酸的生物降解性,又引入了光学可视化功能。
总体而言,Cy5-PLL的结构合成过程具有高度可控性,通过调节标记度与分子量,可实现性能定制化。其特殊的结构使之适用于基因递送可视化、表面功能化涂层以及细胞摄取追踪等研究。
产品名称:CY5-PLL,花菁染料CY5标记聚赖氨酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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