RB-Glabridin,罗丹明标记光甘草定的合成步骤概述
罗丹明B标记光甘草定(RB-Glabridin)是一种将荧光染料罗丹明B(Rhodamine B, RB)与黄酮类化合物光甘草定(Glabridin)通过化学偶联形成的荧光标记分子。光甘草定是从甘草(Glycyrrhiza glabra)中分离得到的异黄酮类化合物,具有酚羟基结构和芳香骨架,生物活性丰富,包括、及抑制酪氨酸酶活性等特性。将RB与光甘草定结合,不仅保留了其黄酮活性,还赋予分子荧光特性,为药物追踪、分子示踪及化学反应研究提供了强有力的工具。
化学结构与偶联原理
RB-Glabridin的化学结构由光甘草定的酚羟基与罗丹明B的活性羧基或异硫氰酸基团通过共价键连接而成。常用偶联策略包括:
酯化偶联:利用光甘草定的酚羟基与罗丹明B-NHS酯反应生成稳定的酯键。该方法操作简便,反应条件温和,能够保持黄酮骨架和羟基功能的完整性,同时实现荧光标记。
硫脲偶联:使用罗丹明B异硫氰酸酯(Rhodamine B isothiocyanate, RBITC)与光甘草定的氨基衍生物反应,生成稳定的硫脲键,这种方式可在不破坏黄酮骨架的前提下实现荧光标记。
合成步骤概述
原料准备
光甘草定需纯化并溶解于适宜的有机溶剂,如二甲基甲酰胺(DMF)或二氯甲烷(DCM)。罗丹明B-NHS酯或RBITC则提前溶解于相容性溶剂,确保反应活性。
偶联反应
将光甘草定溶液与RB活性基团溶液混合,在缓冲条件或弱碱性环境下(pH 7.5–8.5)进行反应。反应过程中可加入少量碱(如三乙胺,TEA)以促进亲核攻击。酯化或硫脲形成反应通常在室温或低温下反应数小时至过夜,避免高温导致黄酮结构降解。
反应监控
通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监控反应进程,观察反应物向产物的转化情况,确保偶联效率。荧光成分的存在使TLC或HPLC分析时可利用荧光检测,提高分析敏感度。
产物纯化
偶联反应结束后,采用透析、凝胶色谱或反相HPLC纯化RB-Glabridin,以去除未反应的罗丹明B、光甘草定及副产物。纯化后产物可在水或有机溶剂中稳定存在,保持荧光特性和黄酮活性。
结构确认与表征
纯化后,利用^1H NMR、^13C NMR和质谱(MS)确认RB-Glabridin的偶联结构及分子量。紫外-可见光谱(UV-Vis)和荧光光谱用于检测荧光性质,验证罗丹明B的光学性能。红外光谱(FTIR)可进一步确认酯键或硫脲键的形成及功能基团完整性。
RB-Glabridin兼具光甘草定的芳香羟基和生物活性,以及罗丹明B的高亮度荧光特性,可用于细胞摄取追踪、药物递送研究及荧光标记分析。同时,通过偶联策略的灵活设计,可调控荧光标记位置、偶联密度及空间排列,从而优化其在化学研究、材料功能化及生物体系应用中的性能。
产品名称:RB-Glabridin,罗丹明标记光甘草定
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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