RB-Chloramphenicol,罗丹明标记氯霉素的反应步骤
罗丹明B标记氯霉素(RB-Chloramphenicol, RB-CAP)是一种通过将氯霉素(Chloramphenicol, CAP)与荧光染料罗丹明B(Rhodamine B, RB)共价偶联形成的荧光标记抗生素。氯霉素是一种含有对氨基苯基、硝基及醇羟基的大环结构分子,能够抑制细菌蛋白质合成,其化学活性位点包括对氨基和羟基。通过RB标记,氯霉素获得可视化追踪能力,用于药物递送、细胞摄取和荧光成像研究。
反应步骤
材料准备
氯霉素(CAP):分子中含有一个主要可反应羟基位点,适合偶联。
罗丹明B-NHS酯(RB-NHS):活化的羧基可与CAP羟基形成稳定酯键。
缓冲体系:通常选择pH 7–8的磷酸盐或碳酸盐缓冲液,以保证亲核反应顺利进行。
溶剂:DMF或DMSO作为有机溶剂,有利于CAP溶解及反应进行。
偶联反应
将氯霉素溶解于适量缓冲体系或有机溶剂中。
向CAP溶液中加入RB-NHS酯,摩尔比可根据预期荧光强度和偶联效率调整(通常1:1至1:2)。
反应在室温下进行数小时(通常2–12小时),避免光照以防RB降解。
反应机制为羟基对RB-NHS酯的亲核攻击,形成酯键,同时释放N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。
反应监控
可通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监测反应进程。
荧光信号出现即表明RB已成功偶联到CAP分子。
产物纯化
反应完成后,通过透析、凝胶渗透色谱或硅胶柱色谱去除未反应RB-NHS及副产物。
纯化后的RB-CAP呈红色荧光,可溶于有机溶剂,适用于细胞和载体实验。
结构确认
可通过质谱(MS)、核磁共振(^1H NMR)和红外光谱(FTIR)确认酯键形成及分子结构。
荧光强度可通过光谱仪测定,以保证偶联效率和实验可追踪性。
通过上述步骤,RB-CAP既保留了氯霉素的活性,又具备罗丹明B的可视化特性,可用于药物递送、细胞内追踪及荧光分析实验。
产品名称:RB-Chloramphenicol,罗丹明标记氯霉素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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