FITC-Glucuronic Acid，异硫氰酸荧光素标记葡糖醛酸的合成步骤

FITC-Glucuronic Acid 是通过异硫氰酸荧光素（Fluorescein Isothiocyanate, FITC）与葡糖醛酸（Glucuronic Acid, GlcA）偶联形成的荧光标记小分子。葡糖醛酸是葡萄糖的氧化衍生物，其 C6 羟基被氧化为羧基，分子中保留多个羟基，具有良好的水溶性和化学可改性。通过FITC偶联，葡糖醛酸获得荧光功能，实现分子可追踪性与光学检测功能的结合，可用于多种生物化学和药物输送体系研究。

FITC-Glucuronic Acid 的合成步骤主要包括以下几个环节：

1. 葡糖醛酸活化或氨基化处理
   原始葡糖醛酸分子含羟基和羧基，但FITC的异硫氰酸基需与氨基反应形成稳定的thiourea键，因此需在葡糖醛酸分子上引入胺官能团。常用方法是将葡糖醛酸的羧基通过活化试剂（如EDC/NHS，1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺）活化形成NHS酯中间体，再与氨或小分子伯胺反应，引入氨基功能。这一步可在弱酸或中性缓冲液中进行，以保证羧基活化的选择性和胺化效率。通过调控反应条件，可获得单胺或多胺衍生葡糖醛酸，为FITC偶联提供反应位点。

2. FITC偶联反应
   将FITC 溶解于无水乙醇或DMSO 中，并缓慢加入胺化葡糖醛酸溶液中，反应体系保持弱碱性（如pH 8.0–9.0）。FITC 的异硫氰酸基（–N=C=S）与胺基发生亲核加成，形成稳定的氨基异硫氰酸酯（thiourea）键。反应通常在室温或轻微搅拌条件下进行数小时至一夜，反应过程中避光以防FITC降解。偶联反应的摩尔比可调控标记度，高比例FITC可增强荧光信号，而低比例可避免分子间猝灭或聚集。

3. 反应监控与进程控制
   偶联反应可通过薄层色谱（TLC）、高效液相色谱（HPLC）或紫外-可见光谱检测FITC的消耗及生成产物的荧光峰变化来监控。通过控制反应时间和FITC与胺化葡糖醛酸摩尔比，可实现目标标记度，确保荧光信号稳定且分子水溶性良好。

4. 纯化步骤
   偶联反应完成后，需去除未反应的FITC和小分子副产物。常用纯化方法包括透析、凝胶过滤或超滤。透析采用适当分子量截断膜，将FITC-Glucuronic Acid 保留在膜内，同时将游离FITC排出。凝胶过滤（如Sephadex G-25）可进一步分离标记产物，获得高纯度均一分子。纯化后的FITC-Glucuronic Acid 通常为水溶性橙黄色溶液，荧光性能稳定。

5. 标记度测定与分子特性评价
   纯化后，可通过紫外-可见光谱测定FITC吸收峰（约495 nm）和荧光峰（约520 nm）强度，同时结合葡糖醛酸浓度计算标记度（Degree of Substitution, DS）。标记度对荧光强度、水溶性及分子稳定性有直接影响，通过调控偶联反应条件可获得适合实验需求的标记产物。

6. 储存与应用条件
   FITC-Glucuronic Acid 水溶液一般储存于低温（4℃）避光条件下，保持荧光强度和分子稳定性。可根据实验需要用于荧光标记、细胞摄取研究、分子扩散实验或作为可视化示踪分子。其水溶性和分子小巧特性使其易于扩散和快速渗透，适用于体外及体内实验体系。

产品名称：FITC-Glucuronic Acid

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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