CY3,全称 Cyanine3,是一种具有鲜艳荧光的合成花青素类染料,属于长链共轭多环化合物。CY3 的核心结构为二唑啉(cyanine)骨架,通过延伸共轭体系,使其具有较高的荧光量子产率和优异的光稳定性。CY3 的吸收峰一般位于 550 nm 左右,发射峰约在 570 nm 附近,因此在绿色-黄色光区表现出明亮的荧光特性,适合多种生化检测和荧光标记应用。
为了方便 CY3 与生物分子或功能分子共价偶联,研究者通常将 CY3 转化为 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester) 形式。NHS 酯是一种广泛使用的活化羧基衍生物,能够与含有初级氨基(-NH₂)或偶尔羟基(-OH)的分子形成稳定的酰胺键。这种化学活性使 CY3-NHS ester 成为高效、可控的荧光标记试剂,能够在温和条件下实现生物大分子或小分子功能化。
化学性质
CY3-NHS ester 的化学结构可分为三部分:CY3 荧光核心、羧基连接臂以及 NHS 活化酯基。其主要化学性质包括:
亲水性与疏水性平衡:CY3 核心为疏水性共轭体系,而 NHS 酯部分在溶剂中较易溶解,可通过适当溶剂调节溶解性。
活性稳定性:在干燥、避光及低温条件下,CY3-NHS ester 可以保持较长时间的稳定性;溶液状态下,尤其在水或含水缓冲液中,容易水解生成无活性的羧基,因此通常在反应前溶解于无水有机溶剂(如 DMSO、DMF)中使用。
光学性质:具有强烈的吸收和荧光发射,荧光强度高,易于在显微镜或荧光检测器中观察。其激发光谱和发射光谱的狭窄特点使其适合多重标记实验,避免光谱重叠干扰。
反应机理
CY3-NHS ester 的标记原理依赖于 NHS 酯的酰化反应机理。NHS ester 中的活性酯与目标分子上的氨基发生亲核攻击,形成稳定的酰胺键,同时释放出 N-羟基琥珀酰亚胺。反应特点包括:
选择性高:主要针对初级氨基,如蛋白质的赖氨酸残基或多肽末端氨基。
温和条件:反应通常在 pH 7–9 的缓冲液中进行,避免高温或极端酸碱条件造成目标分子变性。
快速有效:在适宜浓度下,几分钟到几小时即可完成标记反应。
应用范围
CY3-NHS ester 广泛应用于分子生物学、蛋白质化学和纳米材料领域,主要包括:
蛋白质与多肽标记:用于免疫学实验、蛋白质定位、分子相互作用研究。例如,将 CY3 标记抗体用于荧光免疫检测,可实现高灵敏度和定量分析。
核酸标记:通过偶联氨基修饰的寡核苷酸,实现荧光探针制备,用于原位杂交、PCR 检测及荧光成像。
细胞与组织成像:CY3 的明亮荧光使其适用于细胞标记、活细胞跟踪及组织切片观察。
纳米材料功能化:通过 CY3-NHS ester 修饰纳米颗粒、微球或水凝胶,可实现光学信号追踪与定量分析。
中文名称:花青素CY3标记N-羟基琥珀酰亚胺
英文名称:CY3 NHS ester
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
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