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​Biotin-Heparin,肝素-生物素的制备方法
发布时间:2025-11-10     作者:axc   分享到:

Biotin-Heparin,肝素-生物素的制备方法

肝素-生物素(Biotin-Heparin)是一种由高分子多糖肝素与小分子生物素(Vitamin H)通过化学偶联形成的功能化衍生物,结合了肝素的多阴离子特性与生物素的高亲和力,为生物分析、靶向识别及药物递送提供多功能平台。肝素是高度硫酸化的糖胺聚糖,含有大量羟基、羧基和硫酸酯基团,具有显著的阴离子特性和与蛋白质的多价相互作用能力;生物素则是一种小分子维生素,其与亲和素(Avidin/Streptavidin)具有极高的非共价结合亲和力(Kd约10⁻¹⁵ M),被广泛用于分子标记和生物检测。

肝素-生物素的制备通常依赖于肝素的羧基或氨基化学位点与生物素的活性基团反应形成稳定的共价连接。最常用的化学策略包括使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯化的生物素(Biotin-NHS)与肝素中的游离氨基反应生成酰胺键,或者通过碳二亚胺(EDC)活化肝素羧基,使其与生物素含氨基或羟基的衍生物形成稳定的共价键。该反应机理属于亲核加成-取代反应:在碱性或弱缓冲条件下,肝素上的氨基或羧基充当亲核试剂,攻击活化的羧基NHS酯或碳二亚胺活化中间体,形成稳定的酰胺键,实现分子间的共价偶联。

整个反应过程中,pH、温度和溶剂体系是关键控制因素。反应通常在pH 7–9的缓冲液中进行,以确保肝素的活性位点不会被质子化或降解,同时保证NHS酯或EDC中间体的活性不丧失。温和的室温条件可避免肝素高分子链降解和硫酸基水解。反应时间通常为数小时至一昼夜,确保偶联效率高且结构稳定。

肝素-生物素偶联后,产物兼具肝素和生物素的功能特性。肝素的多阴离子骨架可以与多种蛋白质、酶和细胞表面受体发生静电或多价结合,为分子识别和靶向提供基础;生物素的高亲和力使得偶联产物可以快速、特异性地与亲和素或链霉亲和素结合,实现标记、捕获或靶向运输。该组合优势被广泛应用于免疫检测(ELISA)、生物传感器构建、纳米颗粒表面修饰以及药物递送系统中。

在药物递送与纳米技术中,肝素-生物素可通过生物素-亲和素桥接方式将药物、蛋白或纳米载体固定或靶向特定组织。肝素的疏水与亲水相互作用及多价结合能力,有助于载体在血液中保持稳定,同时生物素-亲和素体系提供高特异性靶向功能,确保药物或荧光探针精确定位。

纯化方面,反应完成后常通过透析、凝胶过滤或离子交换层析去除未反应的生物素和活化剂,获得高纯度的肝素-生物素偶联产物。其水溶性良好、结构稳定,适用于体外和体内实验。

综上所述,肝素-生物素是一种多功能化偶联分子,其反应机理基于NHS活性酯或EDC碳二亚胺活化的亲核加成-取代反应,实现肝素羧基或氨基与生物素活性基团的共价偶联。偶联产物兼具肝素的多阴离子特性和生物素的高亲和力,适用于生物标记、靶向识别、纳米载体功能化及药物递送研究,是化学修饰与生物功能协同应用的重要平台。

产品名称:Biotin-Heparin

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

Biotin-Heparin

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