Sulfo-Cyanine5-hydrazide,水溶性近红外荧光染料Cy5偶联羟肼的介绍
Sulfo-Cyanine5-hydrazide 是一种水溶性近红外荧光染料衍生物,由 Cyanine5(Cy5)荧光核心与羟肼(hydrazide)官能团结合形成。Cy5 提供了高光稳定性、优良量子产率和激发波长约 650 纳米、发射波长约 670 纳米的近红外荧光特性,而羟肼官能团能够与醛基或酮基发生共价偶联,生成稳定的肼或肼腙键。Sulfo-Cyanine5-hydrazide 广泛用于生物标记、糖基化蛋白标记、核酸偶联以及生物材料功能化研究,其纯化与表征对于确保产品质量、荧光活性和偶联效率具有重要意义。
在纯化方面,Sulfo-Cyanine5-hydrazide 通常通过高效液相色谱(HPLC)或柱层析进行分离。由于 Cy5 的水溶性衍生物带有磺酸盐(Sulfo)基团,其在水性体系中溶解性良好,适合使用反相或离子交换 HPLC 分离。反相 HPLC 利用疏水作用将 Cy5 染料与副产物和未反应试剂区分,常用的流动相为水-乙腈混合体系,并含有微量酸(如三氟乙酸 TFA)以调节 pH 和改善峰形。离子交换 HPLC 则利用磺酸盐带来的负电荷特性,将染料与其他中性或正电荷杂质分离。柱层析可作为大规模制备的辅助手段,通过硅胶或树脂柱分离,结合极性梯度洗脱实现杂质去除。
纯化过程中,需要注意避免光漂白和自氧化。Cy5 的共轭体系对光敏感,操作应尽量避光,并在低温条件下进行。羟肼官能团易被空气氧化形成偶联产物或二聚体,因此纯化前常使用惰性气体保护或添加抗氧化剂,如抗坏血酸或二硫苏糖醇(DTT)微量抑制氧化。纯化后的产物应储存在低温、避光和干燥条件下,以保持活性和荧光强度。
表征 Sulfo-Cyanine5-hydrazide 的主要方法包括光谱分析、质谱分析和核磁共振(NMR)分析。光谱分析用于确认荧光性能,紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)可显示 Cy5 特征吸收峰约在 650 纳米,荧光光谱可确认发射峰约在 670 纳米,并可评估荧光量子产率和光稳定性。质谱(如 MALDI-TOF 或 ESI-MS)分析可用于确认分子量和化学结构完整性,判断羟肼端官能团是否保持完整。NMR 分析(如 1H NMR 和 13C NMR)则可提供分子骨架和官能团的结构信息,验证羟肼基团的存在及 Cy5 染料核心的完整性。
此外,纯化后的 Sulfo-Cyanine5-hydrazide 通常还会进行水溶性和缓冲溶液稳定性测试。通过在水或 PBS 缓冲液中溶解,并在不同 pH 条件下监测吸光度和荧光强度,可评估染料在生物体系中的稳定性。这对于后续生物标记或偶联实验非常重要,因为水溶性和稳定性直接影响偶联效率和荧光检测效果。
结合纯化与表征结果,可确保 Sulfo-Cyanine5-hydrazide 在化学偶联和生物标记中具有高活性和可靠性能。纯化保证了杂质去除、化学结构纯净和反应选择性,而表征则验证了荧光性能、分子完整性和官能团可反应性,为后续实验提供可靠基础。该分子在糖蛋白标记、氧化多糖偶联、核酸荧光标记及功能材料构建中,依赖其纯化和表征结果保证偶联效率、荧光稳定性和生物相容性,从而实现精确的分子探针设计与应用。
综上所述,Sulfo-Cyanine5-hydrazide 的纯化主要依靠 HPLC、柱层析和光敏操作,表征则通过光谱、质谱及 NMR 分析进行确认。纯化与表征保证了分子结构完整性、荧光性能稳定性和羟肼官能团活性,为其在生物标记、分子偶联及化学研究中的高效应用提供了基础保障。
产品名称:Sulfo-Cyanine5-hydrazide
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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