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钙离子荧光探针FLUO-2 AM,应用于生物化学和细胞生物学的钙离子荧光探针
发布时间:2025-11-17     作者:axc   分享到:

钙离子荧光探针FLUO-2 AM,应用于生物化学和细胞生物学的钙离子荧光探针

FLUO-2 AM 是一种广泛应用于生物化学和细胞生物学的钙离子荧光探针,用于实时监测细胞内钙信号动态。FLUO-2 属于荧光钙指示剂系列,其化学结构基于荧光素衍生物,并在分子上结合了钙离子选择性结合位点,使其能够对钙离子浓度变化产生荧光响应。FLUO-2 AM 为酯化形式(acetoxymethyl ester),使探针分子呈非极性状态,能够自由穿透细胞膜进入细胞内,进入细胞后被细胞内酯酶水解为带负电荷的活性形式 FLUO-2,从而被困在细胞内并对 Ca²⁺ 产生响应。

在化学组成上,FLUO-2 AM 分子包括三个关键部分:荧光核心、钙离子螯合基团和 AM 酯保护基团。荧光核心通常为荧光素衍生结构,提供激发和发射荧光的能力;钙离子螯合基团由二羧酸或多羧酸基团组成,可选择性与 Ca²⁺ 配位形成稳定复合物;AM 酯基团通过酯化掩蔽羧基,使分子在细胞外呈中性非极性形式,提高细胞膜穿透性。进入细胞后,内源性酯酶催化水解 AM 酯,释放带负电荷的活性 FLUO-2,实现细胞内钙离子的实时检测。

FLUO-2 AM 的钙信号追踪条件主要包括以下几个方面:

  1. 溶解与载体使用
    FLUO-2 AM 可溶于有机溶剂如 DMSO,但通常在实验中需配合载体如 Pluronic F-127 以提高水相中分散性,避免探针聚集或沉淀,提高细胞加载效率。

  2. 细胞加载条件
    探针浓度一般在 1–10 μM 范围内,加载时间 30–60 分钟,温度可在 37℃ 条件下进行,以保证 AM 酯充分进入细胞并被水解。加载过程中避免光照,以减少荧光漂白。

  3. 缓冲体系与 pH 条件
    加载和检测过程通常使用生理缓冲液(如 HEPES 或 HBSS),pH 保持在 7.2–7.4 范围,以维持细胞活性及荧光性能。

  4. 荧光检测条件
    FLUO-2 激发波长约为 488 nm,发射波长在 515–530 nm 范围内。可使用荧光显微镜、流式细胞仪或多通道读板仪进行检测。探针的荧光强度随细胞内自由钙浓度升高而增强,便于定量分析钙信号动态。

  5. 动力学响应
    由于 FLUO-2 对钙离子结合迅速,其响应时间短,可在毫秒至秒级监测快速钙信号变化。结合的可逆性使其能够在多次刺激下重复使用,适合动态追踪实验。

FLUO-2 AM 的主要应用领域包括:

  1. 细胞内钙浓度监测
    在神经细胞、心肌细胞和免疫细胞中,FLUO-2 AM 可用于实时测定钙信号的时空动态,研究 Ca²⁺ 信号在细胞功能、信号转导和代谢调控中的作用。

  2. 药物和受体功能评价
    探针可用于评估药物对细胞内钙水平的调控作用,研究 GPCR、离子通道或受体激动剂/拮抗剂诱导的 Ca²⁺ 动态变化,为药物开发和机制研究提供实验依据。

  3. 生理和病理机制研究
    可用于心肌、神经、平滑肌等细胞中钙信号传导的研究,帮助解析细胞兴奋性、信号传递和代谢调控机制,同时可用于疾病模型中钙信号异常的检测。

  4. 多通道荧光实验
    FLUO-2 AM 可与其他荧光探针联合使用,进行多参数分析,如膜电位、pH 变化和活性氧水平,便于复杂信号网络研究。

产品名称:FLUO-2 AM 

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

FLUO-2 AM

关于我们

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