FITC-NH2,异硫氰酸-氨基是化学修饰形成的功能性分子
异硫氰酸-氨基(FITC-NH2)是一种由荧光染料异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)通过化学修饰形成的功能性分子。FITC 是一种广泛应用于生物化学和分子生物学实验的绿色荧光标记分子,其分子结构中含有苯环体系、羧基、羟基以及异硫氰酸(–N=C=S)活性基团。FITC-NH2 的形成主要是通过异硫氰酸基团与氨基化化合物发生共价偶联,生成稳定的酰脲或酰胺衍生物。该分子在生物体系中广泛用于蛋白质、肽类以及小分子化合物的标记与追踪,为荧光检测和生物分子研究提供了可靠工具。
在化学组成上,FITC-NH2 主要由荧光核心、异硫氰酸活性基团和氨基衍生部分组成。荧光核心负责发射绿色荧光,便于在显微镜或荧光测定仪中可视化检测;异硫氰酸基团是主要反应位点,与氨基化合物反应生成共价连接;氨基衍生部分则提供亲核反应位点,使 FITC 能够稳定偶联蛋白质或小分子。该分子具有良好的水溶性和化学稳定性,适用于多种缓冲体系和实验条件。
FITC-NH2 的纯化与表征是保证其功能和实验可靠性的关键环节,主要包括以下几个方面:
纯化方法
偶联反应后,反应体系中常包含未反应的 FITC、氨基化合物、反应副产物及缓冲盐类。常用纯化方法包括:硅胶柱层析:利用极性差异对 FITC-NH2 进行分离,选择合适的溶剂体系可有效去除未反应染料和副产物。
高效液相色谱(HPLC):反相 HPLC 是纯化 FITC-NH2 的首选方法,通过选择合适的流动相(如水-乙腈体系)和检测波长(一般 495 nm 荧光检测)可获得高纯度产品。
透析或超滤:适用于水溶性 FITC-NH2 的缓冲体系,去除小分子副产物和盐类。
表征方法
FITC-NH2 的结构和纯度通常通过多种分析手段进行确认:质谱分析(MS):可确认偶联产物的分子量,验证氨基偶联是否成功。
核磁共振(NMR):1H-NMR 或 13C-NMR 可用于分析 FITC 核心和氨基衍生部分的化学环境,确认共价键形成。
紫外-可见光谱(UV-Vis):FITC-NH2 具有特定吸收峰(约 495 nm),通过吸收光谱可判断产物浓度及纯度。
荧光光谱:FITC-NH2 的荧光特性(发射峰约 520 nm)可用于确认染料活性及功能性保存。
薄层色谱(TLC):可初步判断反应完成度及纯化效果,结合荧光检测更为直观。
纯化与表征的注意事项
偶联过程中避免光照,因为 FITC 对光敏感,强光会导致荧光衰减。
纯化步骤应在弱光或避光条件下操作,以保证荧光特性。
选择适宜的缓冲体系,保持分子稳定性,避免 pH 过低或过高导致异硫氰酸基水解或降解。
储存时通常在 –20 ℃ 并避光干燥保存,延长稳定性和功能寿命。
产品名称:FITC-NH2
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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