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AF488 蛋白标记试剂盒,Alexa Fluor 488 蛋白标记试剂盒
发布时间:2025-11-24     作者:HLL   分享到:

产品名称:AF488 蛋白标记试剂盒,Alexa Fluor 488 蛋白标记试剂盒

AF488 蛋白标记试剂盒是一款专为蛋白荧光标记设计的标准化试剂盒,其核心组件包括 Alexa Fluor 488(AF488)活性酯试剂、优化的反应缓冲液、淬灭试剂及纯化试剂,旨在通过简单、高效的实验流程,实现对抗体、酶、细胞因子等蛋白分子的 AF488 荧光标记,同时最大限度保留蛋白的生物活性,适用于科研人员快速制备高质量的荧光标记蛋白。

从试剂盒组成与原理来看,各组件协同作用:核心标记试剂为 Alexa Fluor 488 NHS 酯(AF488 NHS),其分子结构含 AF488 荧光染料与 NHS 酯基团 ——AF488 是一款性能优异的绿色荧光染料,激发波长约 495nm,发射波长约 519nm,荧光量子产率高达 0.92,光稳定性远超传统 FITC(约为 FITC 的 2 倍),且对 pH 值不敏感(pH 4-10 范围内荧光稳定),是目前应用最广泛的绿色荧光染料之一;NHS 酯基团可与蛋白的伯氨基(如赖氨酸残基、N 端氨基)在优化的反应缓冲液(通常为碱性缓冲液,如 0.1M 碳酸钠缓冲液,pH 8.3-8.5,该 pH 条件可提高氨基的亲核性,促进与 NHS 酯的反应)中高效偶联,形成稳定的酰胺键。试剂盒还包含淬灭试剂(如氨基乙醇),用于反应结束后终止反应,避免未反应的 AF488 NHS 继续与蛋白作用;纯化试剂(如脱盐柱、离心柱)用于去除未反应的游离 AF488 染料及反应副产物(如 NHS),获得高纯度的荧光标记蛋白。

该试剂盒的核心优势在于 “标准化、高兼容性、高活性保留”:标准化流程简化了实验操作 —— 无需用户自行优化反应条件(如染料与蛋白的比例、反应时间、pH 值),试剂盒提供详细的操作说明书,用户仅需按步骤加入蛋白、染料、缓冲液,反应 1-2 小时后纯化即可,实验成功率高;高兼容性适用于多种蛋白类型 —— 可标记分子量范围广(从 10kDa 的小分子蛋白到 200kDa 的抗体)、浓度范围宽(通常 10-100μg 蛋白即可)的蛋白,且对抗体的抗原结合活性、酶的催化活性保留率高(通常 > 80%),这得益于试剂盒中缓冲液的优化设计,可减少染料对蛋白活性位点的修饰;此外,试剂盒还提供质控方法(如紫外 - 可见分光光度法计算标记率),帮助用户评估标记效果 —— 标记率(每个蛋白分子结合的 AF488 分子数)通常可控制在 1-5 之间,该范围既能保证足够的荧光信号强度,又不会因染料过多导致蛋白聚集或活性下降。

其应用场景覆盖生物医学研究多个领域:在免疫荧光成像中,用于标记一抗或二抗(如 AF488 标记的抗 β- 肌动蛋白抗体、抗兔 IgG 二抗),通过荧光显微镜观察目标蛋白在细胞内的定位(如细胞膜、细胞核、细胞器);在流式细胞术中,用于标记抗体(如 AF488 标记的抗 CD3 抗体、抗 CD45 抗体),分析细胞群体的表型(如 T 细胞亚型、造血干细胞分化阶段);在免疫印迹(Western Blot)中,用于标记二抗,通过荧光成像仪检测目标蛋白的表达水平,相较于化学发光检测,荧光检测具有线性范围宽、可定量的优势;在细胞分选(FACS)中,用于标记特异性抗体,分选表达目标抗原的细胞群体(如 CD4⁺T 细胞、肿瘤干细胞),为后续的功能研究或分子分析提供纯化细胞;在蛋白相互作用研究中,用于标记诱饵蛋白(如 AF488 标记的酶),通过荧光共振能量转移(FRET)或共免疫沉淀(Co-IP)实验,检测其与靶蛋白的相互作用;此外,也可用于标记细胞因子、生长因子等可溶性蛋白,通过荧光信号追踪蛋白与细胞表面受体的结合过程及内化路径。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

AF488 蛋白标记试剂盒

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小编:HLL 2025年11月20日

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