产品名称：AF 660 CTB，Alexa Fluor 660 CTB，Alexa Fluor 660 标记霍乱毒素 B 亚基

AF 660 CTB（Alexa Fluor 660 标记霍乱毒素 B 亚基）是将 Alexa Fluor 660 荧光染料与霍乱毒素 B 亚基（CTB）通过高效化学偶联形成的荧光探针，整合了 CTB 对神经节苷脂 GM1 的高特异性结合能力与 Alexa Fluor 660 的优异荧光特性，在生命科学研究的细胞标记、组织成像、神经追踪及多色分析中具有广泛应用，尤其适用于需要兼顾信号清晰度、检测灵敏度及多靶点共定位的实验场景。CTB 作为霍乱毒素的非毒性亚基，其核心优势在于对细胞表面 GM1 糖脂的高度靶向性 ——GM1 广泛分布于神经细胞、上皮细胞、免疫细胞等多种细胞表面，且在细胞内吞、信号传导、细胞间黏附等关键生物学过程中发挥重要作用，CTB 与 GM1 的结合亲和力极高（解离常数 Kd 约为 10^-10 M），结合后不易解离，能确保探针的精准靶向标记；同时，CTB 无细胞毒性，即使在活细胞长期孵育或活体动物实验中，也不会对细胞活性或组织功能造成明显损伤，安全性和生物相容性良好，为其在多种实验体系中的应用提供了保障。

Alexa Fluor 660 作为一款高性能荧光染料，具有出色的光学特性，是 AF 660 CTB 实现高效检测的核心支撑：其 excitation 波长约为 663nm，emission 波长约为 682nm，处于红光至近红外光过渡区域，该区域的光在生物组织中的散射和吸收程度低于可见光区域（如 FITC 所在的绿光区域），因此 AF 660 CTB 在厚组织切片成像中具有更好的穿透性，能减少组织厚度对信号检测的影响，同时生物组织在该区域的自发荧光信号较弱，可显著降低背景荧光干扰，使标记信号更清晰，信噪比更高，即使在低表达 GM1 的细胞样本中，也能精准识别靶标信号，满足高灵敏度检测需求。此外，Alexa Fluor 660 的荧光稳定性极佳，抗光漂白能力强，在长时间的成像观察（如活细胞实时成像）或多次检测过程中，荧光信号不易衰减，能保证实验数据的稳定性和可重复性；其荧光量子产率较高，在低浓度标记时也能产生较强的荧光信号，可减少因探针浓度过高导致的非特异性结合；同时，Alexa Fluor 660 的光谱特性经过优化，与其他常用荧光染料（如 FITC、Cy3、DAPI、Alexa Fluor 488）的光谱重叠度低，在多色成像或多色流式细胞术实验中，可与这些染料联合使用，实现对多个靶点（如 GM1 与细胞表面标志物、GM1 与细胞内细胞器标志物）的同时标记与观察，为深入分析细胞结构与功能的关联性、分子间的共定位关系提供便利。

AF 660 CTB 的应用场景丰富，覆盖神经科学、细胞生物学、肿瘤学、免疫学及药理学研究等多个领域。在神经科学研究中，AF 660 CTB 是常用的神经示踪剂：由于神经元表面富含 GM1，且 CTB 被神经元摄取后可通过轴突的顺行或逆行运输到达神经末梢或胞体，研究者可将 AF 660 CTB 注射到动物的特定脑区（如海马体、大脑皮层、小脑）或外周神经（如坐骨神经、迷走神经），通过荧光显微镜观察其红色荧光的分布，清晰追踪神经纤维的投射路径，分析神经环路的连接方式，为研究神经系统的发育、神经损伤后的再生机制（如脊髓损伤后的轴突再生）及神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、帕金森病）的病理变化（如神经环路断裂）提供关键的形态学依据。在细胞生物学研究中，AF 660 CTB 可用于细胞表面 GM1 的定位与定量分析：通过荧光显微镜观察，能直观看到 GM1 在细胞表面的分布模式，例如是否集中在细胞膜的特定区域（如脂筏结构、突触前膜、上皮细胞的顶端膜）；结合流式细胞术，可定量检测不同细胞群体（如不同分化阶段的干细胞、活化前后的 T 细胞、正常细胞与肿瘤细胞）表面 GM1 的表达水平，分析细胞状态变化与 GM1 表达的关联性，为研究细胞分化、活化及癌变机制提供数据支持。在细胞内吞作用研究中，AF 660 CTB 可作为受体介导内吞的模型底物：细胞通过 GM1 受体摄取 AF 660 CTB 后，其红色荧光可随内吞囊泡（如早期内体、晚期内体、溶酶体）的运输过程在细胞内移动，研究者通过实时荧光成像技术（如共聚焦激光扫描显微镜的时间序列成像），可动态观察内吞过程的速率、囊泡的运动轨迹及囊泡与其他细胞器（如高尔基体、溶酶体）的融合过程，深入探究细胞内吞的分子机制及调控因素（如药物、细胞信号分子对吞速率的影响）。在肿瘤研究中，肿瘤细胞表面常存在 GM1 的异常表达（如表达量升高或降低、糖链修饰改变），AF 660 CTB 可特异性结合肿瘤细胞表面的 GM1，结合荧光成像或流式细胞术，实现对肿瘤细胞的识别与定量分析：在体外实验中，可用于区分肿瘤细胞与正常细胞，分析不同肿瘤细胞系 GM1 的表达差异；在体内实验中，通过静脉注射 AF 660 CTB，利用其红光区域的荧光特性，可实现对活体动物体内肿瘤的定位和大小监测，为肿瘤诊断及抗肿&药物疗效评估提供参考。在免疫学研究中，免疫细胞（如树突状细胞、巨噬细胞）的活化的过程中，其表面 GM1 的表达会发生变化，AF 660 CTB 可结合流式细胞术，检测不同活化状态下免疫细胞表面 GM1 的表达水平，同时与免疫细胞表面标志物（如 CD11c、CD86）或细胞内因子（如 IL-12、TNF-α）的荧光标记联合使用，分析 GM1 表达与免疫细胞功能的关联性，为研究免疫应答的调控机制提供新视角。

使用 AF 660 CTB 时，需注意以下关键事项：首先，根据实验需求选择合适的样本处理方式，若检测活细胞表面的 GM1，需使用无血清培养基或含低浓度血清的缓冲液（如 PBS+0.1% BSA）稀释 AF 660 CTB，避免血清中的成分与 CTB 竞争结合 GM1，影响标记效果；若检测固定细胞或组织切片，需确保样本固定后 GM1 的结构未被破坏，常用的固定剂为 4% 多聚甲醛，固定时间一般为 15-30 分钟，避免过度固定导致糖基变性；其次，需优化探针的浓度和孵育条件，AF 660 CTB 的常用浓度范围为 1-10 μg/mL，孵育时间为 20-60 分钟，孵育温度根据样本类型选择（活细胞一般为 37℃，固定样本可室温孵育），过高浓度可能导致非特异性结合增加，过低浓度则可能使信号强度不足，建议通过预实验设置不同浓度梯度，确定最佳标记条件；再次，为验证标记特异性，需设置阴性对照实验，常用方法包括：使用过量的游离 GM1（如神经节苷脂 GM1 标准品）预处理样本，竞争性阻断 CTB 与细胞表面 GM1 的结合，若阴性对照样本的荧光信号显著低于实验组，则证明标记具有特异性；使用 GM1 缺陷型细胞系（如通过基因敲除 GM1 合成相关酶的细胞）作为阴性对照，进一步排除非特异性结合的影响；此外，在多色成像或多色流式细胞术实验中，需提前通过光谱分析软件（如 FlowJo、ImageJ 的光谱拆分插件）预测各荧光染料的光谱重叠情况，合理分配荧光通道，例如将 AF 660 CTB 分配到红光通道，FITC 标记的抗体分配到绿光通道，DAPI 分配到蓝光通道，避免光谱重叠导致的信号干扰，确保各靶点信号能被准确区分和定量；最后，在荧光成像过程中，若需长时间观察活细胞，建议使用抗荧光淬灭剂（如含抗氧化成分的活细胞成像培养基），以减少 Alexa Fluor 660 的光漂白，保证荧光信号的稳定性。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年11月27日