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AF 350标记小麦胚芽凝集素,Alexa Fluor 350 WGA的标记方法与化学活性
发布时间:2025-12-18     作者:wyh   分享到:

产品名称:AF 350标记小麦胚芽凝集素,Alexa Fluor 350 WGA的标记方法与化学活性

1. 核心结构与功能整合

WGA(小麦胚芽凝集素):

分子特性:36-43 kDa碱性蛋白质,特异性结合N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和唾液酸残基,广泛用于细胞膜糖基化分析、病原体抑制及神经纤维追踪。

结构基础:含二硫键的两条多肽链,糖结合位点通过氢键/范德华力识别糖类,分子内亚基呈局部准对称性,pH耐受范围广(pH 4-10)。

Alexa Fluor 350(AF 350):

光学特性:激发波长346 nm,发射波长442-445 nm(蓝色荧光),量子产率高、光稳定性良好,适合长时间成像及多色共定位。

化学修饰:通过NHS酯或马来酰亚胺与WGA的氨基/巯基共价偶联,保留WGA的糖结合活性。

2. 物理性质与稳定性

溶解性:水溶性良好,可溶于PBS、DMSO等缓冲液,分子量约36 kDa(WGA)+荧光染料。

储存条件:-20℃避光保存,分装避免反复冻融;复溶后2-8℃短期保存,需惰性气体保护以防氧化。

稳定性:pH 7-9稳定,强酸/碱或高温(>50℃)导致荧光淬灭或蛋白质变性;避光可延缓降解,有效期通常1年。

3. 标记方法与化学活性

偶联策略:

化学键合:AF350-NHS与WGA赖氨酸残基反应,或通过马来酰亚胺与巯基偶联,形成稳定共价键。

纯化步骤:透析、凝胶过滤或HPLC去除游离染料,纯度≥95%;NMR/元素分析验证接枝率,D/P值(染料/蛋白比)控制在2-4以平衡荧光强度与生物活性。

反应优化:pH 7.2-8.5、室温/4℃反应,避免Tris等含氨基缓冲液或还原剂干扰;反应时间30分钟至数小时,需避光操作。

4. 应用场景与功能扩展

生物成像:

细胞/组织标记:活细胞膜糖基化模式追踪、内吞作用研究、组织切片染色(如肿瘤糖基化分析)。

多色成像:与AF488(绿)、Cy5(红)等联用,实现共定位分析;适用于共聚焦显微镜、流式细胞术。

生物分子检测:流式细胞术定量糖基化水平、ELISA/免疫荧光分析、神经元顺行/逆行示踪。

材料科学:纳米颗粒/水凝胶表面糖基化修饰、生物材料界面研究、糖类分布可视化。

功能扩展:结合生物素-链霉亲和素系统或点击化学,实现多模态成像或药物递送。

AF 350标记小麦胚芽凝集素,Alexa Fluor 350 WGA

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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